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DNA甲基化定性及定量研究策略

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ACTIVE MOTIF授权代理商|上海优宁维

DNA甲基化是最早发现的修饰途径之一,大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达,是表观遗传学研究之一。目前DNA甲基化的研究集中于:DNMT活性或抑制剂筛选;比较不同样本间的甲基化状态;DNA甲基化分布;特异基因序列的甲基化图谱;一些新的甲基化修饰等方面。

 
Active Motif致力于DNA甲基化研究,提供一系列DNA甲基化相关的抗体、酶、重组蛋白及DNA甲基化定性、定量试剂盒。
其中,最常用于研究DNA甲基化的抗体为:

抗体

应用

货号

5-Hydroxymethylcytosine (5-hmC) antibody (pAb)

DB, IF, IHC, MeDIP

39769

5-Methylcytosine(5-mC) antibody (mAb)

DB, IHC, MeDIP, IP, FACS

39649

 
DNA甲基化定性研究包括DNA单碱基及全基因组甲基化分布研究。
①DNA单碱基甲基化位点研究采用重亚硫酸盐测序。
原理:亚硫酸盐处理后,未甲基化的胞嘧啶(C)被转化成尿嘧啶(U),甲基化的胞嘧啶保持不变。处理后的DNA通过测序或使用特异性引物PCR得到非常准确的DNA序列甲基化位点信息。缺点是无法区分甲基化(5-mC)和羟甲基化(5-hmC)。
推荐试剂盒:

产品名称

规格

货号

Bisulfite Conversion Kit

50 rxns

55016

FFPE Bisulfite Conversion Kit

40 rxns

55021

 
②甲基化DNA富集:全基因组甲基化分布研究。

其中,MeDIP只识别单链DNA,要先对DNA进行变性处理。hMeDIP可识别单链及双链DNA。而不同样本间甲基化水平定量比较,基于ELISA 原理,操作简单,可进行高通量筛选。

推荐试剂盒:

产品名称

规格

货号

Global DNA Methylation – LINE-1 Kit

1 x 96 rxns

55017

Global 5-hmC Quantification Kit

1 x 96 rxns

55018

 

此外,Active Motif还提供DNMT 活性检测试剂盒:

产品名称

规格

货号

DNMT Activity / Inhibition Assay

1 x 96 rxns

55006

 
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