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筛选加验证,抗体芯片的正确打开方式

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Western Blotting(WB) 几乎是每个生物实验室必备的工具,但在进行多种分析物研究时,这种传统方法显得力不从心,耗时耗力,成本高昂。针对多因子进行半定量检测的高通量蛋白筛选利器——固相抗体芯片应运而生,它是基于双抗体夹心免疫分析原理,省去了繁琐的电泳、转膜过程,拥有更高的灵敏度,样本量远低于WB,实验室的配制能够实现WB分析,就可以选用固相抗体芯片产品。点击查看固相抗体芯片原理及实验操作视频(文章链接)

 

---------------------------------------------------------------------------举个栗子---------------------------------------------------------------------------
检测4个样品中的100个因子,WB至少需要跑100张膜,按照一张膜8个小时的操作时间计算,不眠不休需要34天;若使用固相抗体芯片,只需要4张膜,试剂盒内赠送孵育盒,4张膜可以同时操作,真正的实验操作时间仅需5.5个小时!
 
固相抗体芯片的灵敏度与WB相比,要高很多(>30倍),而检测相同数量的指标所需的上样量更少,甚至只有WB的1/20。
 
不过WB作为经典的蛋白研究手段,有其不可替代的优势。在实际使用过程中,固相抗体芯片可与WB相辅相成,实现从多因子到单因子,初步筛选到精确验证的过渡。
 
 
小编引用两篇文章,让大家感受下抗体芯片的正确打开方式,关于慢性淋巴细胞白血病肿瘤微环境的研究,文章标题:Exosomes released by chronic lymphocytic leukemia cells induce the transition of stromal cells into cancer-associated fibroblasts,作者先用R&D Systems的固相抗体芯片(货号:ARY003B)筛选磷酸激酶靶标,再使用传统实验方法去验证,研究得出chronic lymphocytic leukemia(CLL) 分泌的外泌体可以激活基质细胞相关信号通路。
 
 
在“Sunlight UV-induced skin cancer relies upon activation of the p38α signaling pathway”这篇文章中,作者先通过固相抗体芯片筛选,再由WB验证芯片的数据结果,结果显示信号通路中p38、MSK1/2、CREB在UV处理后被激活。
 

 
现在更多的科学家都在使用抗体芯片产品,R&D Systems 提供的Proteome ProfilerTM固相抗体芯片,每个样本可同时检测多达119个分析物,为确保信号的重复性及可靠性,NC膜上的每种抗体均经过验证并且设有两个平行监测点。另一点值得一提的是,R&D的芯片稳定性非常高,在可视化处理的阶段,拥有更灵活的调整曝光时间,成像出理想的实验结果。
 
优宁维是R&D Systems全国一级代理商,可提供高品质的抗体芯片产品,也可提供芯片实验服务,欢迎感兴趣的老师扫码咨询或预约相关讲座。
 
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