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CNS的宠儿---CRISPR-Cas9

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 自CRISPR-Cas9基因编辑系统被发现，在CNS上的热度一直居高不下，一方面显示出了该系统在基因编辑中的优越性，另一方便也说明了该系统确实有其自身的独特性。
 
在今年的2月15日，《Science》上发表的两项研究分别展示了由 Jennifer Doudna 和张锋实验室基于 CRISPR 系统开发的全新诊断工具；3月15来自Salk生物学研究所的科学家Patrick D. Hsu博士带领团队，开发出了一种新的靶向RNA的基因魔剪——CasRx，并用它纠正了来自痴呆患者的细胞中的蛋白质失衡，使它们恢复到了健康水平，该研究成果发表在cell上；3月19日Nature Biotechnology杂志上刊载了中科院马普计算生物学研究所，上海科技大学生命学院的研究人员发表了题为“Base editing with a Cpf1–cytidine deaminase fusion”的文章，开发出一系列基于CRISPR/Cpf1（Cas12a）的新型碱基编辑器（dCpf1-BE），这种新型碱基编辑系统理论上可对数百种引起人类疾病的基因组点突变进行定点矫正，因此拥有巨大的临床应用潜力。
 
这一系列关于CRISPR的研究在学术界可谓是“一石激起千层浪”，但是这些高大上的研究让我们这些实验小白如何入手呢？
 
今天小编就和各位小白同学聊聊如何进行高效的基因编辑？古语有言“工欲善其事必先利其器”，高效的基因编辑当然离不开优秀的“向导RNA和Cas9核酸酶”，所以开始试验之前需要先选择好的产品----sgRNA&Cas9；那么今天咱们的重点就是sgRNA&Cas9。
 
来自美国的Dharmacon公司在基因编辑领域已经有20多年的历史，该公司提供的siRNA，shRNA，sgRNA，crRNA，Cas9蛋白受到国内外科研工作者的认可，其产品在CNS上引用高达1000多篇，而Dharmacon的sgRNA和Cas9蛋白及其基因编辑的整个流程是在Journal of Biotechnology 233 (2016) 74–83上经过验证的！！
 
Ready---go！！！--实验开始
 
One： 准备好进行实验的细胞系，确定需要进行编辑基因的sgRNA和Cas9蛋白。（Dharmacon提供带有筛选标记的sgRNA和Cas9蛋白。）
Two：把带有筛选标记的Cas9蛋白表达质粒转入细胞进行培养和抗性筛选。
Three：培养抗性筛选后的细胞，转入sgRNA，再次进行抗性筛选并得到能够稳定表达Cas9蛋白的细胞系。
Four：进行细胞测序及鉴定，确定得到的细胞为KO细胞。
有木有很简单！！！整个过程只需1个月哦。
 
最后广告一下：
Dharmacon只需要您提供基因名称或基因ID即可为您推荐最优的sgRNA和Cas9蛋白。
 
产品优势：
1、可以灵活选择启动子和荧光标记；
2、Cas9蛋白选择种类多，分为普通表达质粒，慢病毒质粒，Cas9 mRNA以及Edit-R Cas9（NLS）。
3、专用的DharmaFECT duo和DharmaFECT kb转染试剂。
如有需要，请及时联系Dharmacon的独家代理商---上海优宁维生物

 

 

 

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