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细胞凋亡产品促销

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一、Annexin V检测细胞凋亡细胞膜的改变：

细胞发现凋亡时会有一系列的形态学特征性改变，其中，质膜的改变是早期凋亡的特征之一。细胞发生凋亡时，胞膜磷脂酰丝氨酸（PS）从胞膜内侧翻转到外侧，暴露于细胞表面。Annexin V是一个Ca2+依赖性的磷脂结合蛋白，它与磷酯酰丝氨酸有高度亲和力，可以结合细胞外暴露的磷酯酰丝氨酸。Annexin V标记上FITC、PE或其他荧光素，可以在流式细胞仪上检测凋亡细胞。

二、操作步骤

1、Falcon试管，按照本顺序编好阴性对照管和标本管号。

全血样本制备

• 取枸橼酸钠抗凝全血100ul/样本，加入流式管内，先裂解红细胞

• 制备1×红细胞裂解液（BD Lysing Buffer 10×，Cat.no.555899）

• 取10×红细胞裂解液，按照体积1:9（dH₂O），稀释

• 每100ul全血加入2ml 1×红细胞裂解液，室温裂解10-30min（不同样本存在差异，请随时观察，直至细胞悬液澄清透明终止裂红）

• 裂红后，洗涤细胞，500g，5min，离心弃上清。

• 使用冷PBS缓冲液洗细胞两次，再用1×Binding Buffer缓冲液制成1×10⁶个细胞/ml悬液

• 流式管中加入100ul细胞悬液

人外周血PBMC，原代细胞，细胞系样本制备

• 使用冷PBS缓冲液洗细胞两次，再用1×Binding Buffer缓冲液制成1×10⁶个细胞/ml悬液

• 流式管中加入100ul细胞悬液

2、Falcon试管中加入100ul细胞悬液，分别加入下表相应试剂，避光孵育15min。

Tube	名称	Annexin V-荧光标记	核酸染料	备注
1	阴性对照	-	-	-
2	单阳管1	Annexin V-FITC	-	55℃水浴10min或加入凋亡诱导剂诱导细胞凋亡
3	单阳管2	-	PI	55℃水浴10min或加入凋亡诱导剂诱导细胞凋亡
4	阳性对照	Annexin V-FITC	PI	55℃水浴10min或加入凋亡诱导剂诱导细胞凋亡
5	样本	Annexin V-FITC	PI	PI染料建议在上机前5min添加，以减少背景染色

孵育结束后，各实验管中分别加入1×Binding Buffer缓冲液400ul，半小时内上流式细胞仪测定结果。

三、促销产品：

产品名称	产品编号	特价团购促销价格
BD Pharmingen™ FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit I	556547	¥1850
BD Pharmingen™ PE Annexin V Apoptosis Detection Kit I	559763	¥1850

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