传统的2D细胞培养体系虽然有很多优点,但这些模型缺乏维持原位细胞特性,无法反应细胞与细胞,细胞与基质之间的互相作用。通过纯化分离所得的原代细胞在体外2D培养之后也会失去其原有的功能和特性,3D细胞培养的出现很好的解决了这些问题。
【3D细胞培养】
◆LONZA全新细胞培养系统 3D细胞培养系统
----RAFTTM 将细胞包被于I型胶原蛋白中,RAFTTM Absorber可用于浓缩并构建精确控制的高密度胶原支架,为细胞提供更接近于体内的环境。已知的建立的RAFTTM 3D细胞培养模型有胰岛模型、角膜模型、肿瘤共培养模型、呼吸系统模型、神经系统模型(血脑屏障)、肝脏模型。
----RAFTTM可以支持单一细胞类型培养或多种细胞类型的共培养。
单细胞3D培养模型(细胞处在胶原表面和胶原中) |
四种细胞共培养模型 |
◆Lonza 提供不同种类的原代细胞(部分如下)
品牌 |
产品名称 |
货号 |
规格 |
描述 |
LONZA |
正常成人表皮角质形成细胞NHEK-Ad |
CC-2501 |
≥500,000 cells/ampo |
配套培养基00192060 |
LONZA |
正常人新生儿表皮角化细胞NHEK-Neo |
CC-2503 |
≥500,000 cells/ampo |
配套培养基CC-3111 |
LONZA |
人肺成纤维细胞NHLF |
CC-2512 |
≥500,000 cells/ampo |
配套培养基CC-3132 |
LONZA |
人冠状动脉平滑肌细胞CASMC |
CC-2583 |
≥500,000 cells/ampo |
配套培养基CC-3182 |
LONZA |
人冠状动脉内皮细胞HCAEC |
CC-2585 |
≥500,000 cells/ampo |
配套培养基CC-3202 |
LONZA |
人主动脉内皮细胞HAEC |
CC-2535 |
≥500,000 cells/ampo |
配套培养基CC-3162 |
LONZA |
正常人支气管/气管上皮细胞NHBE |
CC-2540/2541 |
≥500,000 cells/ampo |
配套培养基CC-3170 |
LONZA |
正常人星形胶质细胞NHA |
CC-2565 |
≥500,000 cells/ampo |
配套培养基CC-3186 |
LONZA |
人肝细胞 |
CC-2591 |
3 – 6 × 106 viable |
配套培养基CC-3198 |
LONZA |
人脐带血 CD4+ T Cells (冻存) |
2C-200 |
≥20 million cells |
配套培养基CC-3211 |
◆基质胶细胞培养系统
BD Matrigel是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质,其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白,还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。BD Matrigel基底膜/基质胶形成的三维培养基质,可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时,Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达,支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。
示意图
3D细胞培养相关产品
品牌 |
产品名称 |
货号 |
描述 |
LONZA |
RAFT™ Absorbers for 24-well plate, 48 qty |
016-1R32 |
48个24孔板孔径样式的 |
LONZA |
RAFT™ Insert Absorbers for 24-well plate, 48 qty, for inserts |
016-1R33 |
48个24孔板孔径样式的 |
LONZA |
RAFT™ Plate Kit, 4 x 96 -well clear plate & 4 x 96-well absorber |
016-0R92 |
4×96孔板孔径样式的 |
LONZA |
RAFT™ Reagent Kit |
016-0R94 |
1 x 瓶I型胶原≥ 100 mL |
LONZA |
RAFT™ 96-well bundle kit (contains 016-0R94 & 016-0R92) |
016-1R10 |
包含货号016-0R94 和 |
LONZA |
RAFT™ 24-well bundle kit, contains (016-0R94 & 016-1R32) |
016-1R24 |
包含 货号016-0R94 和 |
LONZA |
RAFT™ 24-well Insert bundle kit (contains 016-0R94 & 016-1R33) |
016-1R25 |
包含货号016-0R94 和 |
LONZA |
RAFTTM 24-Well Small Kit, 3D Reagents & 24-Well Absorbers - 12 Reactions |
016-1R16 |
12个反应和12个24孔板孔径样式的吸收塞 |
LONZA |
RAFTTM 96-Well Small Kit, 3D Reagents and 1 x 96-Well Plate and Absorbers |
016-1R17 |
1×96孔板孔径样式的吸收塞 |
LONZA |
RAFTTM 24-Well Small Transwell Kit, 3D Reagents and Transwell Absorbers - 12 Reactions |
016-1R18 |
12个反应,12个24孔板孔径样式的插入吸收塞 |
BD BioCoat |
基底膜基质(低生长因子) |
356230 |
5ML |
BD BioCoat |
人胚胎干细胞专用的基底膜基质 |
354277 |
5ML |
BD BioCoat |
基底膜基质不含酚红,无LDEV |
356237 |
10ML |
BD BioCoat |
基质胶(高浓度) |
354248 |
10ML |
【3D类细胞培养】
类器官(organoids)-- 通过在体外培养胚胎或成体干细胞,让其增殖分化形成具有一定形态结构及功能的类似于器官的3D细胞团结构。这些细胞结构虽然不是真正意义上的人类器官,但能在结构和功能上模拟真实器官,因此,其在科学研究中发挥着越来越重要的作用。
现有的3D培养的球体形成实验:往往缺乏能自我增殖及分化的干细胞和祖细胞。
常用的各种动物模型:在某种程度上虽然能模拟人的生理状况,但是由于各种不确定变量的出现,通量的限制,人和动物生理的差别导致动物模型还是有所缺陷,因此需要构建一种能够弥补以上缺陷的生物模型,而3D类器官则完美符合了这种模型的需要。
膀胱类器官 |
肾类器官 |
◆类器官培养流程
类器官3D培养基本过程:将永生化的细胞系、原代细胞系、干细胞或外植体等放在基质胶中,以模拟细胞体内生长环境的体外培养方法,然后添加各种生长因子和小分子化合物来诱导分化成不同的类器官。
小肠类器官的培养流程
◆3D类器官培养基质胶
产品 |
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
描述 |
R&D |
Cultrex® PathClear Basement Membrance Extract |
3432-010-01 |
2×5ml |
通用型 |
R&D |
Cultrex® Organoid Qualified,Reduced Growth Factor Basement Membrance Extract(Type2),PathClear® |
3533-010-02 |
2×5ml |
低生长因子。适合生长旺盛细胞和嵌入法。为肠道和肝脏类器官最佳基质 |
◆3D类器官培养优质蛋白和小分子产品
针对不同类器官的培养提供方案
▶peprotech和absin产品种类齐全 细胞因子和重组蛋白(PeproTech)、小分子和激素(absin)。
▶peprotech是Hans Clevers 类器官研究的先行者的提供者 首个可长期培养的类器官 (小鼠小肠类器官)中使用PeproTech的Noggin和EGF,后期制备的各种类器官也均使用PeproTech的细胞因子和蛋白。
▶PeproTech提供世界上最好的R-Spondin 1 生物活性高,稳定。
不同类器官培养应用的生长因子和小分子
类器官 |
生长因子 |
小分子 |
小肠/结肠类器官 |
EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a |
A 83-01、Gastrin、Nicotinamide、SB 202190、Y 27632 |
胃类器官 |
FGF-10、 EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a |
A 83-01、Gastrin、Nicotinamide、SB 202190、Y 27632 |
肝脏类器官 |
BMP-4、EGF、FGF-basic、FGF-10、HGF、Noggin、Wnt-3a |
|
肺类器官 |
Activin A、FGF-basic、FGF-4、Noggin |
CHIR 99021、SB 431542 |
前列腺类器官 |
EGF、Activin A、FGF-basic、FGF-10、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-10b |
A 83-01、SB 202190、Y 27632、Prostaglandin E2、Nicotinamide、Testosterone |
胰腺类器官 |
FGF-10、 EGF、Noggin、R-Spondin 1、Wnt-3a |
A 83-01、Nicotinamide、Gastrin |
肾类器官 |
BMP-2、BMP-4、BMP-7、FGF-basic、FGF-9 |
CHIR 99021、Retinoic Acid |
乳腺类器官 |
Heregulinβ-1、R-Spondin 1、R-Spondin 2、Noggin、EGF、 FGF-basic、FGF-10、Wnt-3a |
Prolactin、Y 27632 |
脑类器官 |
FGF-basic、Noggin、DKK-1、 EGF、BDNF、GDNF |
MK-2206、GDC-0068、Dorsomorphin、Y 27632 |
视网膜类器官 |
SHH、Wnt-3a |
CHIR 99021、Y 27632 |
内耳类器官 |
BMP-4、 FGF-basic |
A 83-01、SB 431542 |
类器官培养相关产品
品牌 |
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
PeproTech |
Human EGF |
AF-100-15 |
100ug/500ug |
PeproTech |
Human Noggin |
120-10C |
5ug/20ug |
PeproTech |
Human R-Spondin 1 |
120-38 |
5ug/20ug |
PeproTech |
Murine Wnt-3a |
315-20 |
2ug/10ug |
PeproTech |
Human FGF-10 |
100-26 |
5ug/25ug |
PeproTech |
Human BMP-4 |
120-05ET |
2ug/10ug |
PeproTech |
Human FGF-basic |
100-18B |
10ug/50ug |
PeproTech |
Human HGF |
100-39 |
2ug/10ug |
PeproTech |
Human/Murine/Rat Activin A |
120-14 |
2ug/10ug |
PeproTech |
Human FGF-4 |
100-31 |
5ug/25ug |
PeproTech |
Heregulinβ-1 |
100-03 |
10ug/50ug |
PeproTech |
Human R-Spondin 2 |
120-43 |
5ug/20ug |
PeproTech |
Human/Murine/Rat BMP-2 |
120-02 |
2ug/10ug |
PeproTech |
Human BMP-7 |
120-03P |
2ug/10ug |
PeproTech |
Human FGF-9 |
100-23 |
5ug/20ug |
PeproTech |
DKK-1 |
120-30 |
2ug/10ug |
PeproTech |
Human/Murine/Rat BDNF |
450-02 |
2ug/10ug |
PeproTech |
Human GDNF |
450-10 |
2ug/10ug |
PeproTech |
SHH |
100-45 |
5ug/25ug |
absin |
A 83-01 |
abs47028218 |
2mg/5mg/10mg/25mg |
absin |
Gastrin |
abs45150387 |
1mg |
absin |
Nicotinamide |
100g/500g |
|
absin |
SB 202190 |
5mg/10mg/25mg/50mg/100mg |
|
absin |
Y 27632 |
2mg/5mg/10mg/50mg |
|
absin |
DAPT |
5mg/10mg/50mg |
|
absin |
Forskolin |
5mg/10mg/25mg/50mg/100mg |
|
absin |
Prostaglandin E2 |
10mg/100mg |
|
absin |
CHIR 99021 |
5mg/10mg/25mg |
|
absin |
SB 431542 |
5mg/10mg/50mg/100mg |
|
absin |
Prolactin |
10ug/50ug/1mg |
|
absin |
Retinoic Acid |
500mg/5g |
|
absin |
MK-2206 |
5mg/10mg/50mg/100mg |
|
absin |
GDC-0068 |
5mg/10mg/50mg/100mg |
|
absin |
Dorsomorphin |
abs810529 |
5mg/10mg/50mg/100mg |