第三代免疫分析技术——神经疾病研究领域用户专访
 >  资讯
资讯

第三代免疫分析技术——神经疾病研究领域用户专访

浏览次数:254

分享:

随着研究的深入,越来越多的学科工作者对免疫学技术提出了更高的要求:更宽的线性范围,更高的灵敏度,更多的可检测指标,更微量的样本检测体积,更开放的平台,更简单的设备操作….
在神经领域,脑脊液血清血浆等微量样本中蕴含着大量的信息,如何借助用力的工具帮助破解疾病发展的密码,我们一起来看看本期邀请到的研究者,他们对现阶段使用的蛋白精准定量技术的一些看法和使用感受!

中科大MSD技术平台


Q

小优:戴博:您好,我是小优,很高兴有机会跟您做这次采访!请问您主要研究什么方向呢?
中科大受访者(戴博:):我们组是关注神经退行性疾病

Q

小优:研究中一般会关注哪些指标?
戴博:神经领域的相关蛋白都会看。我们是神经系统,但是方向比较广,神经的,炎症的,不局限神经的几个marker,还有一些新的靶点我们自己也会做方法学开发检测

Q

小优:项目中蛋白检测您会使用到哪些技术方法呢?
戴博::我们最早使用的是Elisa,后来luminex,然后simoa,MSD是我们最新使用的技术

Q

小优:从酶链免疫到液相多因子,第三代电化学MSD,技术方法真的非常齐全了。戴博:您在实验设计中,会如何选择技术平台呢?
戴博::主要两个考量,一个是灵敏度,我们有些确实浓度比较低,所以需要用到特别灵敏的方法,还有一个是价格,我们会综合判断一下,哪种方法既能很好的检测到同时性价比又比较高。

Q

小优:那综合起来哪种技术会使用比较频繁呢?
戴博::Luminex现阶段用的比较少,早期会多一些,因为技术比较成熟。我们有时候需要同时测7,8个指标均算下来比较划算,但是有时候检测下限不够,一些指标检测不到,而且机器是液流路系统,有时候会出一些问题,所以我们换了方法。

Q

小优:是的,相比液流路系统,MSD电化学平台作为第三代技术方法,灵敏度更高,25ul的样本可以同时检测10个指标,机器使用简单,确实在技术发展上有了更好的体现。

Q

小优:您们现阶段样本检测类型有哪些呢?
戴博:血清、血浆、脑脊液,这些都有。

Q

小优:脑脊液珍贵微量样本,一般用MSD成品试剂盒直接检测吗?
戴博:成品试剂盒以及用MSD平台开发,我们都有。

Q

小优:MSD开发实验整个流程还顺利吗?
戴博::还可以,我们还是蛮熟练的,跟Elisa步骤方法差不多。

Q

小优:是的,都是双抗夹心的原理。
戴博::是的,实验中会有一些自主优化的地方。现阶段遇到的主要问题是我们自己的抗体,有时候不太行,尝试十几种一直测不出来,也有比较幸运的,一两种就可以测出来,测出来之后根据效果可以慢慢再优化。

Q

小优:确实抗体对于开发实验至关重要。戴博:,MSD拥有非常强大的应用科学家支持团队,他们项目经验非常丰富,实验过程中有任何问题也欢迎您们随时联系MSD进行沟通交流。
戴博::好的,有些MSD提供成品试剂盒我们大概率会直接上成品,自己开发的项目主要在价格方面还是有很大的优势的。

Q

小优:是的,MSD作为开放的平台,自主开发实验在成本会有很大的节约。您们现在开发实验都是在MSD平台上实现吗?
戴博:: 对,大部分都是用MSD做开发

Q

小优:好的!除了相关的开发耗材。MSD在试剂盒研发上也一直没有停止脚步,经过几年研发沉淀,今年推出了神经关键指标 tau蛋白的飞克级别splex高敏检测试剂盒以及splex炎症9因子,希望能为您们的研究带来更大的帮助!
戴博::  对,我们也购买了Splex准备测试看看。

Q

小优:好的,后续MSD平台使用过程中有任何实验方案设计、技术细节或流程问题欢迎随时联系我们,祝您们实验顺利,感谢您的时间!
戴博::好的,谢谢你们!
 

第三代免疫分析技术平台MSD——在神经领域的应用:
技术介绍
Meso Scale Discovery (下称MSD) 是目前世界前五的免疫分析技术供应商,也是目前首屈一指的第三代免疫学分析仪供应商。MSD技术是利用专利的SULFO-TAG标记,电化学发光技术、微孔板技术的Multi-array多阵列技术,拥有超高灵敏度和极宽的动态检测范围,操作简单,通量高。在神经退行性疾病研究领域,MSD与AAIC协会,ADNI,华盛顿大学,GSK,英国帝国理工,香港科学大会,华中科技大会,瑞金医院,北京大学第三医院,宣武医院,中检院等学术组织或研究机构长期合作,并在Nature等顶尖期刊发表多篇高水平文献。
  


文献案例
 

本研究检测了aβ34在BACE1缺陷小鼠的大脑、用BACE1特异性抑制剂治疗的大鼠的大脑和脑脊液中的水平和代谢,培养的人神经细胞系(sh-sy5y)和AD不同临床阶段个体的CSF样品。为了实现这一点,研究者使用MSD电化学发光免疫分析技术,使用一种单克隆新表位抗体,该抗体与具有纳米分子亲和力的β34的c-末端特异结合。
 

结果表明,脑BACE1水平在体内对aβ34的产生是有限制的。特别是,在特征良好的临床组中,轻度认知障碍(MCI)患者的脑脊液Aβ34水平显著升高,这些患者后来发展为AD痴呆与经典的aβ40/aβ42比值(即临床上淀粉样沉积的标志物)相比,aβ34/aβ42比值提高了我们区分MCI患者和非MCI患者的能力。在有AD危险的认知正常个体中,csf-aβ34/aβ42比值升高与临床前AD的当前生物标记物一起被检测到,如csf总tau(t-tau)和磷酸化tau(p181)水平升高。此外,淀粉样蛋白阳性(aβ+)个体的aβ清除率与csf-aβ34水平呈正相关。
 

MSD神经相关蛋白检测试剂盒
MSD技术只要25ul样本就可以同时检测Aβ38、Aβ40、Aβ42 可以很好的节约珍贵样本 。
神经退行性疾病研究最常使用的Biomarkers涉及:APP • Aβ38 • Aβ40 • Aβ42 • NFL• NFH• Cystatin C • DJ-1/PARK7 • KC/GRO • MCP-1 • TNF-α • Tau • VEGF-A • α-Synuclein • IL-2 • Enolase 2 • LRRK2 • LRRK2 (pS935) 等。

品名 货号 检测指标
V.-PLEX:ABPeptidePanel·1-(4G8)-
Kit.
K15199E-1 Aβ38,Aβ40,Aβ42·Human,Mouse,
Rat
飞克灵敏度:SLEX·Human·Tau
(pT181)Kit.
K151AGMS Tau(pT181)·Human.
飞克灵敏度:S-PLEX·Human·Tau
(pT231)Kit.
K151AGNS Tau(pT231)Human-
飞克灵敏度:S-PLEX·Human·Tau
(total)-Kit.
K151AGPS Tau(total)/Human.
飞克灵敏度:S-PLEX:
ProinflammatoryPanel-1-(human)-
Kits
K15396S IFN-Y;IL-1β,·IL-2,·IL-4,·IL-6,IL-10,
IL-12p70,-IL-17A,TNE.a.
.PLEX·Neuroinflammatiom-Panel-1-
Human·Kit.
K15049D-1 CRP,Eotaxin,-Eotaxin-3,FGF·
(basic),ICAM-1,-EN-y;IL-1a,IL-1β;
IL-2,IL-4,·1L-5,·1L-6,IL-7,·IL-8,·IL-
10,IL-12/IL-23p40,IL-13,IL-15,·IL-
16,IL-17A,IP-10,MCP-1,MCP-4,;
MDC,MIP-1a,MIP-1β,·PlGE,-SAA,
TARC,Tie-2,TNF..a.-TNE.
VCAM-1,·VEGE.-A,"VEGEC, VEGE-
D VEGFR-1/Flt-1.
R.-PLEX·Human-NeurofilamentL-
Assay with-SECTORTM-plates.
K1517XR-2 Neurofilament-L

优宁维科学仪器部成立于2014年,目前从售前培训、市场拓展、科学仪器销售、技术支持、相关耗材到整体服务为您提供一整套解决方案。

上海优宁维生物科技股份有限公司

试剂 | 耗材 | 仪器 | 软件 | 定制 | 实验服务 | 供应链

免费热线:4008-168-068

咨询邮箱:info@univ-bio.com

订购商城:www.univ-bio.com

微信公众平台:优宁维抗体专家,欢迎关注!

小优博士(小程序):5大课堂, 让你的科研不再难!

公众号
小程序