不同的组织分离试剂，可以满足不同的组织样本（如内皮细胞、结肠、神经系统等）的解离需求，本文就主要针对以下几种酶及试剂盒产品，为大家介绍不同的组织该选择什么样的酶：
胶原酶（Collagenase, type I/ type II/ type IIII/ type IV）
木瓜蛋白酶
DNA酶
神经组织分离试剂盒
广谱组织解离试剂盒
1. 胶原酶（Collagenase）
胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，来源于溶组织梭菌的胶原酶，可以广泛应用于各种组织的解离，在细胞培养、间充质干细胞的分离及获取、3D及类器官培养、单细胞测序、肿瘤研究领域都有着重要的作用。
根据不同的酶活性，胶原酶可以被分为不同类型，主要包括：胶原酶I型、II型、III型、IV型，可以用做不同类型组织样本的解离。
1.1胶原酶I型（Collagenase, Type 1）
I型胶原酶含有比较均匀的酶活性（包括胶原酶，酪蛋白酶，梭菌蛋白酶，胰蛋白酶活性），通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织来源的细胞的制备。
1.2胶原酶II型（Collagenase, type 2）
II型胶原酶含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、肝、甲状腺和软骨等组织来源的细胞制备。
1.3胶原酶III型（Collagenase, type 3）
III型胶原酶，次要蛋白酶的含量最低，常用于乳腺细胞的制备。
1.4胶原酶IV型（Collagenase, type 4）
IV型胶原酶含有较低的胰酶活性，因此可以减少对膜蛋白及受体的损伤。常用于胰岛细胞的制备，或者是需要维持受体完整性的细胞的制备实验。
胶原酶部分产品清单：
| 产品 | 酶活性 | 货号 | 规格 |
| Collagenase, Type 1 （冻干粉） | ≥125 units per mg dry weight | LS004194 | 100mg |
| LS004196 | 1g | ||
| LS004197 | 5g | ||
| Collagenase, Type 2 （冻干粉） | ≥125 units per mg dry weight | LS004174 | 100mg |
| LS004176 | 1g | ||
| LS004177 | 5g | ||
| Collagenase, Type 3 （冻干粉） | ≥100 units per mg dry weight | LS004180 | 100mg |
| LS004182 | 1g | ||
| LS004183 | 5g | ||
| Collagenase, Type 4 （冻干粉） | ≥160 units per mg dry weight | LS004186 | 100mg |
| LS004188 | 1g | ||
| LS004189 | 5g |
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2. 木瓜蛋白酶（Papain）
木瓜蛋白酶是一种半胱氨酸水解酶，在广泛的条件下是稳定和活跃的，甚至可以在高温的条件下保持酶活性。
木瓜蛋白酶可以用于细胞培养中的组织解离成单细胞，用它来进行的细胞分离时会比其他蛋白酶更温和，因此更适用于皮质神经元、视网膜和平滑肌的组织分离，尤其适合对神经组织进行分解。
同时，它还可用于蛋白质结构研究中的肽定位；抗体筛选或鉴定中红细胞的表面修饰；用IgG和IgM抗体制备Fab片段抗体；对膜蛋白进行整体增溶；从纯化蛋白多糖中生产糖肽以及酶促伤口的清创。
木瓜蛋白酶部分产品清单：
| 产品名称 | 产品描述 | 酶活性 | 货号 | 规格 |
| Papain, Suspension | 含有0.05M的醋酸钠的悬液，悬液经过两次结晶和0.22µm滤网的过滤 | Activates to ≥ 20 Units per mg protein | LS003124 | 25mg |
| LS003126 | 100mg | |||
| LS003127 | 1g | |||
| Papain, Lyophilized | 冻干粉，由含醋酸钠的两次结晶悬浮液配制而成。 | Activates to ≥ 15 Units per mg protein | LS003118 | 25mg |
| LS003119 | 100mg | |||
| LS003120 | 1g | |||
| PDS Kit, Papain Vial | 冻干粉，经过0.22μm膜过滤，在高压灭菌瓶中进行冻干。用5ml EBSS重溶后可以得到每毫升含有20units的papain（溶液中含有1毫摩尔L-cysteine和0.5mm EDTA） | Activates to ≥ 100 Units per vial | LK003176 | 1 vial |
| LK003178 | 5 vials |
3. 脱氧核糖核酸酶（Deoxyribonuclease I）
牛胰腺脱氧核糖核酸酶（DNase I）是一种内切酶，它优先分裂与嘧啶核苷酸相邻的磷酸二酯键，产生5 ' -磷酸端多核苷酸，在3 '位置有一个游离羟基。DNase I由外分泌腺体分泌，在胰腺和腮腺中最为丰富。DNase参与细胞凋亡的过程，并被认为在调节细胞内肌动蛋白聚合中发挥作用。除了在分子生物学上的应用外，DNase I还被用于治疗囊性纤维化和系统性红斑狼疮
DNaseI通常有以下几个用途：
1. 去除细胞培养过程中DNA的含量，可以降低黏度，因此获得更多的细胞；
2. 用于生物过程中的DNA移除；
3. 在进行RT-PCR前，除去RNA制剂中的基因组DNA；
4. 体外转录
5. Nick翻译
6. DNase I足迹分析
7. 肌动蛋白结合
8. 蛋白质与核算的UV交联
9. 放射性标记
DNase I酶部分产品清单：
| 产品名称 | 产品描述 | 酶活性 | 货号 | 规格 |
| Deoxyribonuclease I | 冻干粉，包含glycine固定剂 色谱纯化级别 | ≥2,000 Kunitz units per mg dry weight | LS002004 | 5 mg |
| LS002006 | 20 mg | |||
| LS002007 | 100 mg | |||
| 冻干粉，包含glycine固定剂 色谱纯化级别，特别是对低含量（≤0.0005%）的RNase A 活性成分 | ≥2,000 Kunitz units per mg dry weight | LS006330 | 25 ku | |
| LS006328 | 125 ku | |||
| 冻干粉 部分纯化 | ≥2,000 Kunitz units per mg dry weight | LS002138 | 25 mg | |
| LS002139 | 100 mg | |||
| LS002140 | 1 g | |||
| 冻干粉 部分纯化 | ≥1,250 Kunitz units per mg dry weight | LS002145 | 100 mg | |
| LS002147 | 1 g |
4. 神经组织分离试剂盒（Papain Dissociation System）
Papain Dissociation System是基于美国科学家Huettner和Baughman对神经细胞分离方法而研发出来的一套试剂（J. Neurosci., 6, 3044, 1986）。每个批次都在大鼠脊髓神经细胞分离中进行过性能测试，该试剂盒为每个实验提供新鲜制备的酶溶液。
该包装包含足够的材料分离5个独立的组织等分体，每个高达0.3-0.4立方厘米。对于较大的组织样本，在每个步骤中按比例准备较大体积的试剂，并按协议中所述的相同比例将其组合。
试剂盒内容物包括：
Vial 1：含有钙，镁，碳酸氢盐和酚红的EBSS溶液，此试剂的等分液用于重溶其他小瓶和制备稀释的抑制剂溶液。
Vial 2：含有L-cysteine和EDTA的木瓜蛋白酶，每盒里包含5 × 100 unit可供一次性使用的小瓶。该试剂是0.22μm的膜过滤并在高压灭菌瓶中冻干。用5ml EBSS溶液重溶(Vial 1)可得到每毫升 1mM的 L-cysteine和0.5mM EDTA中20units的木瓜蛋白酶溶液。
Vial 3：脱氧核糖核酸酶I (DNase I)，5×2000单位，每盒里包含5 × 100 unit可供一次性使用的小瓶。该试剂是0.22μm的膜过滤并在高压灭菌瓶中冻干。用0.5ml EBSS溶液重溶(Vial 1)可得到每毫升产生2000units的DNase I溶液。
Vial 4：类卵母细胞蛋白酶抑制剂Ovomucoid protease inhibitor，每包1瓶，重溶后体积为32ml。
该试剂是0.22μm的膜过滤并在高压灭菌瓶中冻干。用32ml的 EBSS溶液重溶(Vial 1)生成的溶液的有效浓度为每毫升10mg类卵母细胞抑制剂和10mg白蛋白。
神经组织分离试剂盒产品清单：
| 产品描述 | 规格 | 货号 |
| Papain Dissociation System | 1 Kit | LK003150 |
| 3 Kits | LK003153 | |
| Papain Dissociation System（without buffer/EBSS ） | 1 Kit | LK003160 |
| 3 Kits | LK003163 |
5. 组织分离广谱酶试剂盒（Cell Isolation Optimizing System）
Cell Isolation Optimizing System是一个完整的方法开发工具包，包含细胞培养/组织解离实验中最常用的酶，并包含了操作、使用和优化酶细胞分离方法的指导、参考资料和方法。适用于需要对不同的组织类型进行分离获得单细胞，并对科研经费有要求的实验室。该试剂盒提供更经济实惠的选择
产品清单如下：
| 产品描述 | 规格 | 货号 |
| Cell Isolation Optimizing System | 1 Box | LK003200 |
| 内容物清单 | ||
| Collagenase，Type 1 | 500 mg dw | - |
| Collagenase，Type 2 | 500 mg dw | - |
| Collagenase，Type 3 | 500 mg dw | - |
| Collagenase，Type 4 | 500 mg dw | - |
| Trypsin | 500 mg dw | - |
| Hyaluronidase | 50,000 Units | - |
| Elastase | 100 mg P | - |
| Papain | 100 mg P | - |
| Deoxyribonuclease I | 25 mg dw | - |
| Neutral Protease (Dispase® | 10 mg dw | - |
| Trypsin Inhibitor | 100 mg dw | - |
优宁维也为大家提供了《组织分离指南》工具，帮助广大科研工作者根据自己的研究样本类型（如肠、脑、脊髓等），选择合适的蛋白酶种类及浓度。
除此之外，Worthington还提供有可针对不同应用的蛋白酶类产品，如下表所示：
参考文献：
Huettner, James E., and Baughman, Robert W.: Primary Culture of Identified Neurons from the Visual Cortex of Postnatal Rat, J. Neuroscience, 6, 3044 (1986).
