Fixable Viability Dye死活细胞鉴定染料
一、为什么要进行细胞鉴定？
★ 死细胞带来非特异性染色
★ 会导致背景增高，影响检测数据的灵敏度
★ 死细胞染色影响正常的结果比例
二、Fixable Viability Dye（FVS）与传统染料PI/7-AAD有和区别？
1）PI、7-AAD的问题
PI、7-AAD的染色通常是放在其他抗体孵育完成后进行，不能洗涤即要上机检测；
对于胞内抗体的染色，由于经过了固定步骤，经过PI或7-AAD染色后所有的细胞都是阳性，所以它们只适合胞膜染色的死活细胞鉴定。
而PI、7-AAD与常用染色通道PE PerCP是同一检测通道，二者只能选择其一使用。
PI和7AAD发射谱很很宽，488 nm蓝色激光发射基本上580BP和690BP都被占用，这样大大减小了多色试验中的配色和调补偿的难度
2）Fixable Viability Dye的优点是：
▶ 固定、破膜以及洗涤步骤不影响Fixable Viability Dye的染色
▶ Fixable Viability Dye的光谱多样，适合各种染色组合的搭配。FVS系列有多种，分别对应不同的激光器，发射出不同波长的光，而且发射谱很集中。
三、Fixable Viability Dye使用原理
FVS为氨基反应性染料，与细胞表面或者内部的蛋白不可逆的结合。FVS是染细胞表面或膜内侧的游离胺，活细胞弱阳，死细胞强阳。正是由于和PI 、7-AAD原理不同，所以对于一些需要固定破膜步骤的试验FVS一样适用，如果固定破膜后细胞发生死亡，该染料还是能反应细胞的死活情况，这点是核酸染料所不能替代的。
实验原理图：
实验结果图：
四、订购产品清单
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货号
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产品名称
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规格
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562247
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BD Horizon Fixable Viability Stain 450
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0.1mg
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564406
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BD Horizon Fixable Viability Stain 510
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0.1mg
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564407
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BD Horizon Fixable Viability Stain 520
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0.15mg
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564405
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BD Horizon Fixable Viability Stain 660
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0.1mg
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FVS450
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FVS510
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FVS520
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FVS660
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激发波长
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404nm
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408nm
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498nm
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649nm
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发射波长
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448nm
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512nm
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521nm
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660nm
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激光器
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405nm紫色激光
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405紫色激光
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488nm蓝色激光
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622nm红色激光
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替代
荧光染料
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V450, BV421
Pacific Blue™
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V500, BV510
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FITC, Alexa Fluor 488
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APC, Alexa Fluor 647
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