【罗工秘籍35】固定破膜知多少

固定破膜知多少？
问：罗工，流式细胞术里都有哪些情况要做固定破膜呀？
答：首先固定和破膜是2个步骤哦，我们来看看都有哪些情况吧。
关于固定，涉及胞内染色的步骤都需要先固定，不然我们的细胞就像气球被扎，破裂了。那只做表面染色还需要固定吗？也是会有的，比方我们去平台上机，约不到仪器或需要等待上机时间；另外，像这次的新冠样本的研究，大家需要考虑样本的安全性，也是需要固定剂的帮助。
关于破膜，跨膜蛋白的胞内段检测，大家不要以为CD Marker都是表面染色哦，有些跨膜蛋白会因为胞外没有合适的位点，对应的抗体是设计在胞内段的。还有大家熟悉的胞浆中的蛋白检测，细胞核内的蛋白、核酸的检测，另外信号通路磷酸化的蛋白检测。
问：原来有这么多情况都涉及，那我要怎么成功完成实验？
答：因为涉及的情况很多，目前很多商品化的试剂能帮助大家更快、更好的完成实验，省去大家不少测试时间。但我们也要了解一下这些试剂的基本原理信息，以便选择和后续实验问题的排查。