RNAlater 具备如下诸多显著优势
RNAlater 具有极为卓越的特性:它赋予了研究者在时空上的极致自由,无论何时何地,皆可从容采集组织样本,后续处理可按需灵活延期。其灵活性无与伦比,彻底摆脱了对液氮冷冻样本的依赖,亦无需即刻将样本送返实验室冷藏,同时摒弃了繁琐的冷冻与研磨环节,无疑是当下组织采集领域的不二之选。在不同温度条件下表现卓越,RNA 于 37℃可安然稳定保存 1 天,25℃达一周之久,4℃长达 1 个月,在 -20℃及 -80℃更可实现长期储存。用于后期转录组测序或表达谱芯片分析时,所获聚类成果出类拔萃,相较液氮速冻处理的样本优势尽显。

RNAlater 溶液的使用方法如下
使用 RNAlater 溶液时,首先需将切割后尺寸小于 0.5 厘米的组织浸没于 5 至 10 倍体积的室温 RNAlater 溶液内,例如 0.5 克的样品,2.0 至 5.0 毫升的 RNAlater 溶液即可满足基本需求。因 RNAlater 溶液需渗入细胞方可稳定 RNA,故完成浸没操作后,样品可于室温(25℃)存放 1 周,4℃存放 1 个月,或在 -20℃与 -80℃条件下长期储存。
当进行 RNA 提取或分离操作时,将组织从 RNAlater 溶液中取出,后续步骤与刚采集后的组织处理方式相同。尽管部分坚硬组织如骨头可能需采用更剧烈的破碎手段,但多数组织可直接置于裂解缓冲液中,或进行匀浆化处理。经 RNAlater 溶液处理且冰冻的样品,可用研钵和研杵研磨,亦或解冻后按新鲜组织的处理方式操作,且均不会对 RNA 质量产生影响。
RNAlater 溶液在维持 RNA 完整性方面表现出色,即便对于那些 RNA 酶含量较高、通常难以提取完整 RNA 的组织(如脾脏),也能成功实现 RNA 完整性的有效维持。
与各类 RNA 分离流程均具备良好的兼容性
RNAlater 溶液可适配多种 RNA 提取手段以契合后续建库之需,诸如裂解 RNA 一步提取法、硅膜柱吸附法、酸性苯酚提取法,以及运用 oligo (dT) 对 mRNA 进行选择性分离均可适用。组织样本自 RNAlater 溶液中取出极为便捷,能如同新鲜组织一般在 RNA 裂解液(例如 TriZol 等)里予以处理。
再者,经 RNAlater 处理的组织亦能先行冰冻研磨,而后添加至裂解液内。悬浮细胞中的 RNAlater 溶液可借助离心予以去除,随后加入裂解缓冲液,在部分情形下,RNAlater 溶液能够与细胞一同径直加入到裂解缓冲液之中。
RNAlater 溶液应用实例展示
RNAlater 溶液经广泛测试,涵盖各类哺乳动物组织、血液、植物、细菌、非洲蟾蜍、鱼类以及果蝇等生物样本类型,其适用场景极为丰富:
- 于 RNA 酶含量丰富的组织,如脾脏或胰脏中,可有效守护 RNA 的完整性,即便在不同时间点采集样本,也无需即刻处理各时间点所取样本。
- 经其处理后的样本可用于后续的显微分离操作,为精细的生物学研究提供有力支持。
- 能够填充动物体腔或用于浸泡器官,在长时间的解剖操作进程中,确保 RNA 处于稳定状态。
- 可在不具备即时进行 RNA 分离条件的场所进行样本采集工作,极大地拓展了样本获取的灵活性。
- 如需进行隔夜运输,借助冰浴甚至在室温条件下即可运输样本,为样本的转运提供便利且安全的方式。
RNAlater 所适配的组织类型
