封片剂
封片剂的定义与基本概念
封片剂是当样品在显微镜下成像时所处的介质。最简单的封片剂类型是空气，或者各种盐缓冲溶液，如PBS。然而，多数人在提到封片剂时，通常指的是通过免疫荧光标记进行固定细胞成像时使用的载体介质。而在活细胞成像中，人们更常使用“成像剂”来表示成像时样品所处的介质。
技术参数要求
| 指标 | 理想值/特性 | 作用机制 |
|---|---|---|
| 折射率 | 1.48-1.52 | 减少光散射，优化物镜成像清晰度 |
| 透明度 | 无色透明 | 避免背景干扰 |
| 化学稳定性 | 不含氧化剂或酶类 | 防止荧光染料降解 |
| 固化性能 | 无结晶/开裂 | 维持样本空间结构完整性 |
根据实验需求匹配参数
| 实验类型 | 推荐封片剂特性 | 典型应用案例 |
|---|---|---|
| 免疫荧光多重标记 | 高折射率（1.52）、多染料兼容性 | 细胞器共定位分析 |
| 厚组织切片成像 | 硬化型、抗脱水性能强 | 脑切片三维重构 |
| 长期保存样本 | 化学惰性、抗氧化稳定性高 | 临床病理存档 |
封片剂在固定细胞成像中的作用
在进行免疫荧光标记的固定细胞成像时，将样品放入封片剂中具有重要意义。首先，封片剂的选择很大程度上依赖于样品类型、成像方式以及所使用的荧光染料或荧光蛋白。为了从免疫荧光成像中获得准确、可重复的结果，必须最大限度地提高实验样品中荧光信号的强度和稳定性。
荧光信号的损失主要由不可逆的光漂白过程造成，这会显著降低灵敏度，尤其是在目标分子丰度较低或激发光强度较高、持续时间较长的情况下。为了尽量减少实验样本的光漂白，建议使用合适的封片剂。荧光显微镜用封片剂的褪色特性受其中添加的化合物（如抗氧化剂和自由基清除剂）的影响。这些化合物会干扰光化学反应，从而使激发的荧光色素不受损害。例如，1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷（DABCO）作为自由基清除剂，可以大大减少褪色。
封片剂的特性要求
封片剂应具备以下特性：
1. 折射率尽可能接近1.5，以减少光的折射和散射，提高成像质量。
2. 无色透明，以避免对成像造成干扰。
3. 不会导致染色剂扩散或褪色，选择何种封片剂取决于所使用的染色方案。
4. 对细胞或组织成分无不良影响，以确保样品的完整性和稳定性。
5. 保护样本免受物理和化学作用（如氧化）的影响，以延长样品的保存时间。
6. 凝固时不会结晶、开裂或皱缩，这适用于需要固化的封片剂。
常见问题与优化方案
| 异常现象 | 原因分析 | 解决方案 |
|---|---|---|
| 荧光信号快速衰减 | 抗氧化成分失效 | 更换含DABCO的新型封片剂 |
| 成像背景模糊 | 折射率不匹配（n＜1.45） | 选用折射率1.52的专用介质 |
| 封片剂结晶 | 湿度＞80%或保存不当 | 控制环境湿度，密封避光保存 |
需要固化的封片剂的使用步骤
使用需要固化的封片剂的一般步骤如下：
1. 将封片剂涂布在样品上，确保封片剂完全覆盖样品。
2. 在封片剂上盖上盖玻片，轻轻挤压以去除气泡。
3. 在观察样品之前，封片剂必须完全固化。建议在3孔、8孔、12孔可移除腔室载玻片中使用需要固化的封片剂。
结语
封片剂在显微镜成像中起着至关重要的作用，不仅保护样品免受物理和化学损伤，还提高了成像的清晰度和稳定性。选择合适的封片剂并正确使用，对于获得高质量的成像结果至关重要。
| 名称 | 货号 | 规格 |
| 中性树胶（镜检用永久封片剂） | abs9177-100ml | 100ml |
| 抗荧光淬灭封片剂（水溶性） | abs9240-5ml | 5ml |
| 抗荧光淬灭封片剂（含DAPI） | abs9235-5ml | 5ml |
| 甘油明胶封片剂 | abs9287-50ml | 50ml |
