Percoll 与 Ficoll
NO.1 细胞分离液有哪些？区别是什么？
1.1 细胞分离产品的主要种类
细胞分离产品主要分为 Percoll 和 Ficoll 两种，它们在应用范围和分离原理上存在显著差异。
Percoll
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应用范围：Percoll 的应用范围较广，不仅适用于分离不同密度的细胞，还可分离亚细胞器和病毒。它能够实现从 1.02 - 1.3 g/ml 范围内的密度梯度离心分离，适合多种细胞类型和亚细胞结构的分离需求。
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优势：广泛的密度范围、高纯度分离、多功能性（可分离细胞、亚细胞器和病毒）。
Ficoll
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应用范围：Ficoll 是一种特定密度的分离液（常见密度为 1.077 g/mL、1.084 g/mL 和 1.073 g/mL），主要用于分离已知密度的细胞，如外周血单个核细胞（PBMC）。
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优势：高特异性、操作简便、广泛应用（尤其在临床和研究中分离 PBMC）。
NO.2 使用细胞分离液在离心过程中对离心升降速的要求
1.2 离心过程中的升降速要求
整个梯度离心过程要求慢升慢降，以避免破坏密度梯度。需要在离心机中设置适当的加速度，一般有 1 到 9 级可选。
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Percoll：升降速均需设置为 3 的加速度。
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Ficoll：升速时无特殊要求，但降速时需慢，建议关闭刹车，设置加速度为 3。
NO.1 Percoll 的保存方法
2.1 保存条件
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未开封：Percoll 在未开封时可在室温下保存 5 年。
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开封后短期保存：开封后短期内可保存在 4 - 8℃，使用前需放置在常温一段时间。
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长期保存：若长时间不使用，Percoll 可冷冻保存在 - 18℃。拿出融化时会形成梯度，使用前必须先颠倒混匀。
NO.2 Percoll 是否无菌
2.2 无菌性
Percoll/Percoll PLUS 在生产过程中经过高温灭菌处理，打开后可直接使用。如果需要灭菌，可在 120℃下灭菌 30 分钟，但注意只有原液可以灭菌，配置后的溶液或 SIP 不建议灭菌。
NO.3 Percoll 和 Percoll PLUS 的区别
2.3 产品对比
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Percoll：PVP 涂层硅胶介质，适用于科研。
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Percoll PLUS：共价偶联烷硅涂层硅胶介质，性质更稳定；内毒素含量低（<2EU/ml），有法规文件（RSF 文件）支持，可用于临床研究。
NO.4 Percoll 分离细胞所需的密度
2.4 密度选择
建议参考文献配置相应的密度。以下密度可作为参考：
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细胞类型：根据具体细胞类型和实验需求选择合适的密度。
NO.5 Percoll 的配置方法
2.5 配置方法
Percoll 的配制一般有两种方法：
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百分比两步稀释法：
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首先用一份的 1.5M NaCl 或 2.5M 蔗糖加九份 Percoll 原液，得到 100% 的 SIP 溶液。
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在此基础上，再按照百分比使用 0.15M 的 NaCl 或 0.25M 的蔗糖进行配置。
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密度一步稀释法：
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按照以下公式进行计算（具体公式需参考产品说明书）。
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NO.6 Percoll 的 pH 值
2.6 pH 值
Percoll 的 pH 约为 9.0，可在不改变任何性质的情况下调节为 5.5 到 10.0。如果 pH 降低到 5.5 以下，可能发生胶凝作用。在存在二价阳离子时也会导致凝胶作用，升高温度会加剧这种作用。
NO.1 Ficoll-Paque PLUS 和 PREMIUM 的区别
3.1 产品对比
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Ficoll-Paque PLUS：适用于科研。
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Ficoll-Paque PREMIUM：在符合 GMP 的车间生产，有法规文件（RSF 文件）支持，可用于细胞治疗和临床研究。有三个密度（1.073 g/mL、1.077 g/mL、1.084 g/mL）。
NO.2 Ficoll 的保存条件
3.2 保存条件
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未开封：Ficoll 应避光储存于 4 - 30℃之间，在该条件下可以保存 3 年。
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开封后：建议避光存储于 4 - 8℃，使用前先放置在常温一段时间。不建议冷冻储存。
NO.3 Ficoll 是否无菌
3.3 无菌性
Ficoll 在生产过程中已经进行灭菌处理，可以直接使用。
NO.4 用 Ficoll 分离人外周血中淋巴细胞时，各层细胞的位置
3.4 分离结果
离心完成后，从管底往上依次为：
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红细胞
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粒细胞
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Ficoll 细胞分离液
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淋巴细胞
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血小板
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血浆
在取淋巴细胞时，需小心移除上层的血浆和血小板后再吸取淋巴细胞。
NO.5 用 Ficoll 分离人外周血中淋巴细胞时，血液样品和 Ficoll 的比例
3.5 样品比例
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小体积样品：
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样品：Ficoll 的高度比约为 3:2.4 或体积比 4:3。
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大体积样品：
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可通过增加离心管的直径来进行分离，保持同样的高度比例。增加离心管直径并不影响所需的分离时间。
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NO.6 Ficoll 分离人外周血单个核细胞（PBMC）的原理
3.6 分离原理
根据细胞密度的不同进行分离。单个核细胞的体积、形状和比重与其他细胞不同：
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红细胞和多核白细胞：比重较大，约为 1.092，沉于分离液底部。
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淋巴细胞和单个核细胞：比重约为 1.075，位于分离液界面之上。
利用 Ficoll 作密度梯度离心时，各种血液成分将按密度梯度重新分布聚集：
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血浆和血小板密度较低，悬浮于分离液上部。
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红细胞与粒细胞密度较大，沉于分离液底部。
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PBMC 密度稍低于分离液，位于分离液界面之上，移去上层组分即可获得 PBMC。
| 名称 | 货号 | 规格 |
| PERCOLL 1L | 17089101 | 1L |
| Percoll PLUS 1L | 17544501 | 1L |
| Percoll® | sc-500790 | 25ml |
| Percoll® PLUS | sc-296039B | 1L |
