红细胞裂解液
红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer,亦称 ACK Lysis Buffer)是一种高效且简便的去除红细胞的方法。其原理是利用裂解液特异性地裂解红细胞,同时不损伤有核细胞,从而实现红细胞的充分去除。这种方法因其温和性,广泛应用于多种实验场景,包括经酶消化分散的组织细胞的分离纯化、淋巴细胞的分离纯化,以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中的红细胞去除。
在实验过程中,使用红细胞裂解液处理后,得到的组织细胞中将不含红细胞。这些细胞可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和提取等下游应用,为后续实验提供了高质量的细胞样本。
中文名 | 红细胞裂解液 | 类 型 | 去除红细胞最简便易行的方法 |
外文名 | Red Blood Cell Lysis Buffer | 用 途 | 经酶消化分散组织细胞的分离纯化 |
保存条件
2-8℃保存
使用说明
组织细胞样品:
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将新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液,离心后弃去上清液;
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从 4℃冰箱中取出 ELS 裂解液,按 1:3 - 5 的比例向细胞沉淀中加入 ELS 裂解液(1ml 细胞压积加入 3 - 5ml 裂解液),轻轻吹打混匀;
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以 800 - 1000rpm 的速度离心 5 - 8 分钟,离心后弃去上层红色清液;
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收集沉淀部分,加入 Hank’s 液或无血清培养液离心洗 2 - 3 次;
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若裂解不完全,可重复步骤 2 和 3;
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重悬细胞,用于后续实验;若提取 RNA,建议从步骤 4 开始使用 DEPC 水配制的溶液进行操作。
血细胞:
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取新鲜抗凝血,离心后弃去上清液;
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从 4℃冰箱中取出预冷的 ELS 裂解液,按 1:6 - 10 的比例向细胞沉淀中加入 ELS 裂解液(1ml 细胞压积加入 6 - 10ml 裂解液),轻轻吹打混匀;
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以 800 - 1000rpm 的速度离心 5 - 8 分钟,离心后弃去上层红色清液;
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收集沉淀部分,加入 Hank’s 液或无血清培养液离心洗 2 - 3 次;
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若裂解不完全,可重复步骤 2 和 3;
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重悬细胞,用于后续实验;若提取 RNA,建议从步骤 4 开始使用 DEPC 水配制的溶液进行操作。
作用原理
氯化铵是红细胞裂解液的主要活性成分。氨根离子无法通过细胞膜,而其他离子可以自由通过,从而导致细胞内外离子浓度出现差异,形成渗透压差。外部的水分会因渗透压差扩散至细胞内,使红细胞膨胀,最终达到裂解的效果。
名称 | 货号 | 规格 |
红细胞裂解液(1×) | abs9101-500ml | 500ml |
红细胞裂解液(10×) | abs9241-100ml | 100ml |
红细胞三糖 | abs42077958-500ug | 500ug |
EdU-647 细胞增殖检测试剂盒(流式) | 560506 | 50Tst |