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BCA蛋白定量试剂盒:精准蛋白质定量解决方案的技术革新与应用拓展

时间:2025-05-21 11:52:00
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BCA蛋白定量试剂盒

技术原理

BCA蛋白定量法的核心机制基于改良型双缩脲化学显色反应:在碱性环境(pH≈11.3)中,蛋白质肽键通过双电子还原反应将二价铜离子(Cu²⁺)定量还原为一价铜离子(Cu⁺);随后,二喹啉甲酸(Bicinchoninic Acid, BCA)与Cu⁺发生特异性螯合,形成稳定的水溶性紫蓝色络合物。该络合物在562 nm波长处呈现最大特征吸收峰,其摩尔吸光系数(ε=22,000 M⁻¹cm⁻¹)较传统双缩脲试剂提升近100倍,确保在20~2000 μg/mL浓度范围内吸光度值与蛋白质含量呈严格线性相关(R²>0.999)。此显色体系通过双波长校正设计(562 nm/690 nm)有效消除样本浊度干扰,兼具高灵敏度与强抗干扰特性,尤其适用于复杂生物基质(如细胞裂解液、血清)中总蛋白的精准定量分析。

BCA蛋白定量试剂盒

蛋白质定量是生物医学研究的基石性技术,贯穿于酶活性分析、Western blot标准化及蛋白质组学研究等关键环节。上海优宁维生物科技股份有限公司推出的BCA蛋白定量试剂盒(货号:abs9232-2500T-GP),基于经典的二喹啉甲酸(Bicinchoninic Acid, BCA)显色反应原理,通过技术创新与工艺优化,实现了蛋白质定量的高灵敏度、宽动态范围及强抗干扰能力,为科研工作者提供了稳定可靠的蛋白质浓度测定工具。

核心优势

BCA法通过两步反应实现蛋白质定量:在碱性环境中,蛋白质肽键将二价铜离子(Cu²⁺)还原为一价铜离子(Cu⁺),随后BCA与Cu⁺螯合形成稳定的紫蓝色复合物,该复合物在562 nm波长处具有特征性吸收峰,其吸光度值与蛋白质浓度呈严格线性关系(R²>0.999)。相较于传统的Lowry法,BCA法显著降低了去垢剂(如SDS、Triton X-100)及还原剂(如DTT)的干扰,尤其适用于复杂生物样本的定量分析。该试剂盒实现了多项性能突破:检测范围覆盖20 μg/mL至2000 μg/mL,通过稀释倍数调整可兼容低丰度(如细胞因子)与高丰度(如全细胞裂解液)样本;最低检测限达5 μg/mL,较改良Lowry法灵敏度提升3倍;全程操作仅需30分钟,显著优于传统BCA试剂盒(60~90分钟);配方中添加专利螯合剂,可耐受5 mM EDTA及0.1% SDS,兼容RIPA裂解液等复杂缓冲体系。

 

产品特点与技术创新

该试剂盒构建了标准化操作体系与样本兼容性扩展方案:采用独特的BCA-CuSO₄预混配方,避免传统分步配制导致的批次差异;配套梯度浓度牛血清白蛋白(BSA)标准品(0~2000 μg/mL),支持即开即用;提供96孔板专用工作液,支持高通量检测(CV<5%),兼容酶标仪自动分析。针对样本类型复杂性,试剂盒可适配血清、血浆、脑脊液等临床样本,通过基质匹配校准曲线消除基质效应干扰;针对组织匀浆等粘稠样本,配方中添加渗透增强剂以提升蛋白质溶解效率;在pH 4~10范围内保持检测稳定性,适配变性/非变性条件下的蛋白定量需求。

应用领域与技术价值

在基础研究中,该试剂盒可精准测定表观遗传学研究中的组蛋白提取液蛋白浓度(50~500 μg/mL),为ChIP-seq实验提供标准化输入,并通过动态监测细胞裂解液的蛋白浓度变化(时间梯度:0~24小时),解析细胞应激反应的时相性特征。在药物开发领域,试剂盒可定量测定抗体偶联药物(ADCs)研发中抗体纯化液的蛋白浓度(1~10 mg/mL),支持偶联反应的摩尔比计算,并评估纳米载体包封蛋白药物的载药量(检测范围:100~1000 μg/mL),优化制剂工艺参数。临床诊断中,试剂盒可定量检测体液标本中的肿瘤标志物(如PSA、CEA),其批内精密度(CV=2.1%)满足临床检验要求,并通过标准化操作流程(SOP)实现不同批次样本检测结果的实验室间可比性。

实验操作规范与质控要点

标准检测流程为:将BSA标准品按0、25、125、250、500、1000、2000 μg/mL浓度梯度加样至96孔板;取2~20 μL样本与工作液混合,37℃孵育30分钟;采用酶标仪检测562 nm波长处光密度值(OD值),通过四参数逻辑回归拟合标准曲线。质量控制标准包括:不同生产批次试剂的OD值CV值≤3%,保障实验可重复性;4℃避光保存条件下,试剂有效期长达24个月,开瓶后6个月内性能无衰减;通过添加干扰物质对照孔(如5% SDS),验证样本基质对检测结果的干扰阈值。

总结与展望

BCA蛋白定量试剂盒通过技术创新与工艺优化,建立了蛋白质定量分析的新标准,其宽动态范围、高灵敏度及强抗干扰能力为复杂生物学研究提供了精准工具。随着单细胞测序及类器官培养技术的兴起,该产品可进一步集成于微量蛋白定量平台,在生物标志物发现及精准医疗领域展现更广阔的应用前景。上海优宁维生物科技股份有限公司将持续迭代产品性能,助力科研工作者破解蛋白质定量分析中的关键技术瓶颈。

 

该产品6.18活动大促中

名称 货号 规格
BCA 蛋白定量试剂盒 abs9232-500T 500T
BCA 蛋白定量试剂盒 abs9232-2500T 2500T

 

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