1、拿到分子筛之后，需要认真检查分子筛外观是否完整，各部位配件是否完好，填料是否充满整个柱管。
2、在连接柱子之前，应确保上样缓冲液和仪器管道中没有气泡。移除连接在柱子上的储液装置。检查上端的柱头是否锁死（检查黑色的locking ring是否压至最底端）。
黑色箭头所示的配件是locking ring（Increase分子筛）。
3、未拆开的新柱子里填装有20%乙醇，在使用前应先用去离子水冲掉柱子里乙醇后继续使用。分子筛超压会严重损坏柱床，因此在连接仪器之前需设置报警压。
（1）根据柱子的耐受压设置对应的仪器报警压。各分子筛耐受压力如下表：
| 柱子名称 | Pre column pressure | delta column pressure |
| Superdex 30/75/200 increase 10/300 | 5 MPa |
3 MPa |
| Superose 6 Increase 10/300 | ||
| Hiload 16/600 Superdex 30/75/200 pg | 0.5 MPa |
0.3 MPa |
| Hiload 26/600 Superdex 30/75/200 pg | ||
| Superdex 30/75/200 increase 3.2/300 | 5 MPa |
2 MPa |
| Superose 6 Increase 3.2/300 | ||
| Superdex 30/75/200 increase 5/150 | 10 MPa |
3 MPa |
| Superose 6 Increase 5/150 |
如果仪器没有柱位阀，只能设置系统压，则系统压设置为delta column pressure+空载压力和pre column pressure两者中较小的那个数值。
（2）系统设置一个低流速（0.3 ml/min），以液滴对液滴的方式把层析柱连接到对应的柱位阀上。
（3）使用去离子水平衡柱子2个柱体积。(Hiload 1个柱体积）
（4）使用缓冲液平衡柱子2个柱体积。
（5）进行后续上样等操作。如果样品粘度较高或者在低温环境下上样，或者上样过程中压力上升较高，则需适当降低上样流速。
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