一、分子筛短期保存
1、分子筛在使用后用缓冲液清洗1-2个柱体积;
2、取下柱子后,连接储液装置和堵头,以防止柱子干裂;
储存装置(shipping device)使用视频:https://www.univ-bio.com/article/id-4846.html
二、分子筛长期保存
如果超过2天不使用层析柱,建议使用1-2倍柱体积的水冲洗柱子后再使用1-2倍柱体积的20%乙醇冲洗柱子保存。(Hiload Superdex 30pg与Hiload Superdex 75pg建议在20%乙醇中加入0.2M NaAc,以保持pH的稳定)。
1、分子筛在使用后用缓冲液清洗1-2个柱体积;
2、使用1-2柱体积去离子水冲洗柱子;
3、使用1-2柱体积20%乙醇冲洗柱子;
4、取下柱子后,连接储液装置和堵头,以防止柱子干裂;
应注意:层析柱需在4-40℃条件下储存,不可冷冻保存和运输。
三、分子筛定期清洗和再生
分子筛使用3-5次后,或者层析柱顶端颜色改变,发生堵塞,超压,分辨率下降等情况时,建议进行定期清洗和再生。
Superdex和Superose系列(反向清洗)
1、用1柱体积(CV)0.5 M氢氧化钠或0.5 M醋酸清洗层析柱;
2、立即用1 CV去离子水和至少2 CV缓冲液冲洗层析柱;
Hiprep Sephacryl系列(正向清洗)
1、用1柱体积(CV)0.2 M氢氧化钠清洗层析柱;
2、立即用1 CV去离子水和至少2 CV缓冲液冲洗层析柱;
如果常规清洗仍无法达到理想的效果,可以根据残留物的不同选择其它的清洗方式:例如:0.5M 醋酸溶液,0.5M精氨酸,1M NaOH,8M尿素或者6M 盐酸胍(针对蛋白沉淀),30%异丙醇(对于脂类或者疏水物质),再者还可以考虑使用胃蛋白酶(1mg/ml溶于0.1M醋酸、0.5M NaCl中)消化,再使用NaOH清洗。然后再用2个柱体积的水和2个柱体积的缓冲液平衡。(Sephacryl最高使用0.5M NaOH清洗)
四、层析柱堵塞的原因也可能是滤膜堵塞,此时需要更换滤膜。
更换滤膜视频:
(1)Superdex/Superose Increase顶膜更换:https://www.univ-bio.com/article/id-4655.html
(2)Superdex/Superose Increase底膜更换:https://www.univ-bio.com/article/id-4654.html
(3)Hiload Superdex拆柱膜:https://www.univ-bio.com/article/id-4656.html
(4)Hiload Superdex换柱膜:https://www.univ-bio.com/article/id-4657.html
常用滤膜货号
Superdex/Superose Increase
货号 | 名称 | 层析柱柱型 |
29053612 | TRICORN 10 Filter Kit | 10/300 |
29053586 | TRICORN 5 Filter Kit | 5/150 |
Hiload Superdex
支撑网
货号 | 名称 | 层析柱柱型 |
19065101 | SUPPORT SCREEN | 16/600 |
18937701 | SUPPORT SCREEN | 26/600 |
筛网
货号 | 名称 | 层析柱柱型 |
18876101 | NET RING XK 16(10UM), PKG/5 | 16/600 |
18876001 | NET RING XK 26(10UM), PKG/5 | 26/600 |
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