一、开机
开启主机电源，打开电脑，仪器power灯持续闪烁后，双击Unicorn软件，系统连接后，power灯变绿，灯光常亮。
二、去离子水泵洗
把管道A1和A2泵头放置到去离子水中，点击软件：
Manual——Manual Instructions——Pumps——Pump A/B wash
以去离子水高流速置换仪器管道中的20%乙醇，并去除气泡。
三、缓冲液泵洗
把需要用到的管道A1泵头放置到需要使用的缓冲液中（缓冲液需要提前过滤和除气泡），点击软件：
Manual——Manual Instructions——Pumps——Pump A/B wash
以缓冲液润洗整个仪器管道。
四、收集器准备
放入需要使用到的收集器，点击软件：
View——Fraction Collector Content查看收集器是否正常连接。
五、把样品添加至样品环（Sample loop）
样品环两端分别连接上样阀的loop E和loop F，用填充有去离子水的注射器清洗样品环，再用缓冲液润洗样品环，上样样品。
六、设置报警压
根据层析柱说明书设置柱前压和delta压，点击软件：
Manual——Manual Instructions——Alarms——Alarm pre column pressure、Alarm delta column pressure
七、连接层析柱
先给系统开一个低流速，然后以液滴对液滴的方式连接柱子。
开流速：
Manual——Manual Instructions——Pumps——System flow (流速可以参考0.3ml/min)
选择要用的柱位（如果仪器有柱位阀）：
Manual——Manual Instructions——flow path——column position
将层析柱连接到选择的柱位上：
用缓冲液补齐上端缺口后，再拧上接头。
八、选择保存路径
软件自动保存数量有限，会不断替换，建议每次实验都把结果保存在电脑上。
Manual——Manual Instructions——Save results as
九、平衡层析柱
Manual——Manual Instructions——Pumps——System flow
平衡后将UV归零
Manual——Manual Instructions——Monitor——Auto zero UV
十、上样
将样品环中的样品打入至层析柱中。
Manual——Manual Instructions——flow path——Injection Valve
十一、目标蛋白收集
建议初次实验按照固定体积收集。
Manual——Manual Instructions——fraction
十二、柱子清洗和保存
缓冲液清洗1-2CV，去离子水清洗1-2CV，如果柱子长期不用，充入20%乙醇。取下柱子，连接堵头和储液装置。
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