外泌体定量
前言
在生物医学领域，外泌体（Exosome）作为新兴的细分研究方向，热度呈指数级攀升，当下其研究热度依旧有增无减。此前，针对外泌体的提取方法曾有深入探讨。而如今，当外泌体完成提取后，精准测定提取所得外泌体的含量以及判断所提取外泌体的纯度是否达标，成为了关键问题。随着科学技术的飞速发展以及各类先进仪器设备的不断涌现，针对外泌体定量分析的方法也日益丰富多元。本文将总结几种常见的外泌体定量方法，以供广大科研工作者参考与借鉴。
方法比较
在生物医学领域，外泌体的定量分析是研究的关键环节之一。以下是几种常见外泌体定量方法的对比分析：
蛋白总量测定方法
蛋白总量，测定例如BCA和Bradford检测，因其操作简便、快速，常被用于比较不同样品中外泌体的含量。这种方法通过测量样品中的总蛋白量来间接反映外泌体的量，这也是文献中常用的表示方式，通常以微克（μg）或毫克（mg）为单位。然而，这类方法无法区分外泌体蛋白和非外泌体蛋白，因此在分析时需要确保样品中不含或含有稳定量的非外泌体蛋白。此外，Bradford试剂无法穿透外泌体膜，且与浓度在0.125%以上的Triton-X100以及SDS不兼容，因此仅适用于外泌体表面蛋白的定量。
动态光散射技术（DLS）
动态光散射技术（DLS）是一种广泛应用于脂质体表征的技术，由于外泌体与脂质体在形态上相似，DLS也被用于外泌体的测量。DLS基于瑞利散射原理，通过观察散射光强度随时间的变化，推算出溶液中颗粒的大小。在研究外泌体时，DLS具有高灵敏度，检测下限可达10纳米，并且样品前处理简单，仅需过滤，测量速度快。然而，DLS测量的是光强度的波动数据，大颗粒的光强波动信号容易掩盖小颗粒的信号，因此不适合用于大小不一的复杂外泌体样本的测量。
纳米颗粒跟踪分析技术（NTA）
纳米颗粒跟踪分析技术（NTA）利用激光散射显微成像记录纳米粒子在溶液中的布朗运动轨迹，并通过Stokes-Einstein方程推算粒子的大小和分布。NTA在精准性上优于DLS，现已成为外泌体表征和定量的主流方法。尽管如此，NTA是对溶液中所有颗粒的整体测量，无法区分外泌体与其他非外泌体颗粒，因此在分析时需注意样品的纯度。
综上所述，每种外泌体定量方法都有其独特的优势和局限性，研究者应根据研究目的和样品特性选择合适的定量方法，以确保实验结果的准确性和可靠性。
基于电阻感应脉冲（RPS）技术的纳米颗粒分析法
该方法是在电解质液体中的芯片孔两侧设置电极，当电流通过时，小孔周围形成局部电感应区。颗粒通过小孔时，会置换出对等体积的导电液体，导致该区域电阻变化，形成电位脉冲信号。通过精确测量和分析这些信号，可获取颗粒的多维信息。RPS技术具有单颗粒检测能力，其粒径分辨率可达1纳米，且不受样本光学性质影响，相较于传统光学整体测量方法具有显著优势。
纳米流式细胞术（NanoFCM）
NanoFCM借鉴了传统流式细胞术的原理，利用散射和多色荧光信号对悬液中的颗粒进行检测，可揭示颗粒的粒径分布、基因表达以及特异性蛋白表达等特点。然而，传统流式细胞术由于灵敏度限制，难以检测直径在30-150纳米范围内的外泌体。NanoFCM突破了这一局限，能够检测低至30纳米的外泌体散射光信号。其采用单粒子逐个测量计数的方式，记录每个粒子的信息，灵敏度极高，分辨率几乎可与电子显微镜相媲美。
此外，还有一种基于ELISA检测原理的方法，通过识别外泌体表面特定标志物（如CD9、CD63、CD81等）来实现外泌体的定量分析。这种方法相较于测定总蛋白量，能有效区分带有特异性表面膜蛋白的外泌体与非外泌体蛋白，从而实现外泌体含量的快速检测。然而，目前这种方法在相关文献中的应用相对较少。
综上所述，这些外泌体定量方法各具特点，研究者应依据具体的研究需求和样本特性，选择最合适的定量策略，以确保实验结果的准确性和可靠性。
| 名称 | 货号 | 规格 |
| 外泌体定量检测试剂盒 | abs50054-96T | 96T |
| 外泌体提取试剂盒 | abs9775-1mL | 1mL |
| 外泌体专用裂解液 | abs9587-20ml | 20ml |
| 外泌体DNA提取试剂盒 | abs60364-50T | 50T |
