SMAD3（SMAD家族成员3）是TGF-β（转化生长因子-β）信号通路中的关键蛋白，负责将细胞表面信号传递到细胞核，调控基因表达 。此外，SMAD3还涉及多种生物学过程，包括细胞分化、增殖、凋亡、免疫反应、骨骼发育（如成骨细胞分化、骨矿化）、胚胎发育（如中胚层形成、心脏发育）、以及TGF-β受体信号通路的调控等，是TGFβ/SMAD信号通路检测的重要指标。
THUNDERTM TR-FRET时间分辨荧光共振能量转移是一种基于荧光共振能量转移（FRET，Fluorescence Resonance Energy Transfer）和时间分辨荧光（TRF, Time-Resolved Fluorescence）的技术，采用夹心法，检测胞内SMAD3磷酸化水平和总SMAD3水平。
全程免洗，仅需加样+加检测试剂→酶标仪读值
图1：THUNDER TR-FRET检测原理及流程示意图
将A549细胞（75000个细胞/孔，三复孔）与连续稀释TGF-b1在37°C下孵育15分钟。 数据显示，TGF-b1处理后的A549细胞，可以明显检测到SMAD3在S423/S425位点的磷酸化，但对总SMAD3的表达水平没有影响。
图2：A549细胞TGFβ1刺激检测磷酸化SMAD3数据
将A549细胞（75000个细胞/孔，三复孔）与连续稀释的抑制SB431542在37°C下共孵育15分钟。 后用0.5nM的TGF-b1刺激细胞，在37°C下孵育15分钟。 数据显示，SMAD3在S423/S425位点的磷酸化水平明显下降，但总SMAD3的水平没有影响。
图3：A549细胞TGFβ1刺激SB431542抑制检测磷酸化SMAD3数据
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*磷酸化/总蛋白检测试剂提供以下规格：100 points，500 points，2500 points，5000 points，10000 points。
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