Naveni PLA常见FAQ-2
Q:玻片在成像前可以保存多久?
A:如果玻片安装正确,可以在 +4°C(避光)条件下保存,而无需担心信号丢失的风险。然而,我们建议在实验后的几天内对玻片进行成像
Q:NaveniFlex 试剂盒中red或者Atto647荧光基团分别使用什么滤光片检测?
A: 根据荧光显微镜上的首选滤光片组选择。例如选择NaveniFlex Tissue RED,带有用于Cy3.5滤光片组的荧光染料(Abs max:595 nm,Exc max:627)和NaveniFlex Tissue Atto647N,带有荧光染料用于Cy 5滤光片组(Abs max:649 nm;Exc 最大 662 nm)。
Q:NaveniFlex Tissue能否同时阻断细胞特异性背景和自发荧光?
A:不能,只有组织内特定细胞类型产生的非特异性背景被阻断。对于大多数组织,自发荧光的强度远低于PLA信号,因此易于检测。如果您有自发荧光问题,我们建议您选择带有 Atto647N 检测荧光团的 NaveniFlex 组织试剂盒。如果问题仍然存在,则可以在 FITC 通道中识别并减去自发荧光。
Q:NaveniFlex Tissue怎么进行共染色?
A:使用NaveniFlex组织进行共染色有两种方法。一种是使用直接偶联有荧光团的一抗,另一种是使用偶联有荧光团的二抗。如果您采用后一种方法,则必须确保您二抗所靶向的一抗不是与用于NaveniFlex组织检测的两个一抗同一种属的抗体。
如果使用直接与荧光团偶联的一抗进行共染色,将该抗体加入检测混合物中,并孵育30分钟。如果需要,可以延长孵育时间。
如果使用与荧光团偶联的二抗,在后封闭步骤中加入一抗,在检测步骤中加入二抗。后封闭步骤和检测步骤都可以根据需要延长。
从步骤8.4开始,按照提供的试剂盒说明书进行协议的最后步骤。
Q:可以在小鼠组织上使用NaveniFlex吗?
A:在许多情况下,可以通过用未标记的抗鼠二抗(最好是驴抗鼠二抗)进行额外的封闭步骤(在室温下进行1小时)来降低背景信号。确保最终的抗体浓度不低于0.1 mg/mL。对于某些检测,将封闭时间延长至室温2小时或4°C过夜可能会更有效。在这种情况下,可以使用更低的抗体浓度。在常规封闭步骤之后进行额外的封闭步骤,并确保在封闭前后均对样品进行洗涤。
Q:可以将NaveniBright试剂与NaveniFlex试剂一起使用吗?
A:不可以
Q:NaveniFlex/Bright能否通过与两种以上的抗体一起孵育样品,同时检测一个样品中的多种蛋白质-蛋白质相互作用?
A:不可以
Q:使用Navenibright如何进行成像?
A :为了获得最佳质量的图像,我们建议使用至少有20倍物镜的明场显微镜。请确保选择正确的焦平面,以便使信号处于焦点上。在整个实验过程中,保持显微镜的所有设置恒定是非常重要的。
白平衡:当您在明场下成像时,照射到样本上的光有时会显得“更暖”或“更冷”。这可能导致图像中的物体看起来比实际颜色更偏橙色或蓝色。并非所有相机都能自动调整这种变化。白平衡使您可以将图像背景中的一个区域定义为白色,从而校准相机以看到图像中的真实颜色。
成像后,应将玻片在室温下保存。
相关产品:
货号 |
产品名称 |
描述 |
NaveniFlex Cell MR RED |
适用于细胞样本,鼠兔一抗,带有Red/Atto647荧光基团 |
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NaveniFlex Cell MR Atto647N |
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NaveniFlex Tissue MR RED |
适用于组织样本,鼠兔一抗,带有Red/Atto647荧光基团 |
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NaveniFlex Tissue MR Atto647N |
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NaveniBright HRP |
适用于细胞,组织样本,鼠兔一抗明场下检测 |
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Naveni TriFlex Cell MR |
适用于细胞样本,鼠兔一抗,检测和定量总蛋白 A、总蛋白 B 以及两种蛋白之间的相互作用 AB。 |
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NaveniLink |
寡核苷酸偶连试剂盒 |
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Naveni PD1/PD-L1 HRP |
PD-1/PD-L互作试剂盒,明场检测 |
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Naveni PD1/PD-L1 Atto647N |
PD-1/PD-L互作试剂盒,带有Atto647荧光团 |
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Naveni CD8/MHCI Atto647N |
CD8/MCHI互作试剂盒,带有Atto647荧光团 |
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Naveni Bright BOND RX HRP |
适用于FFPE组织或细胞切片, 搭配BOND RX/RXm ,实现自动化检测蛋白质相互作用或蛋白质修饰 |
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Naveni PD1 PD-L1 BOND RX HRP |
搭配BOND RX/RX m ,实现自动原位可视化 PD1/PD-L1 的相互作用。明场下检测。 |
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NaveniFlexTM BOND RX RED |
搭配 BOND RX/RXm ,通过 Naveni® 原位技术检测蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用或蛋白质修饰。使用Red/Atto647N 荧光基团进行检测。 |
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NaveniFlexTM BOND RX Atto647N |
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Naveni PD1/PDL1 BOND RX RED |
搭配BOND RX/RX m ,实现自动原位可视化 PD1/PD-L1 的相互作用。使用Red/Atto647N 荧光基团进行检测。 |
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Naveni PD1/PDL1 BOND RX Atto647N |
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NaveniPlex |
可同时检测 PD-1/PD-L1、CD8/MCH1的互作以及CD3。适用于FFPE组织样本。 |
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S-RMab® PD-1 Recombinant Mouse mAb (SDT-R143) |
PD-1重组鼠抗,应用IHC-P,ICFCM,ICC,WB,IP |
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PD-1 Recombinant Rabbit mAb (SDT-035-25) |
PD-L1重组兔抗应用IHC-P |