快速内切酶BspQI

BspQI属于 Type IIS 型限制酶，识别非回文序列，并在识别序列之外进行切割，常用于Golden Gate组装。经过优化的反应 Buffer使BspQI最大限度发挥功能，同时反应缓冲液包含重组白蛋白，其可增强多种酶的稳定性。
识别位点：
5‘...C G T C T T C (N)₁↓...3‘
3‘...G C A G A A G (N)₄↑...5‘
同裂酶：SapI, LguI, PciSI
注：同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性。
建议反应条件：
1× HN 缓冲液；
50℃温育；
参照“DNA 酶切流程”配制反应体系。
失活条件：
80℃温育 20 min
活性定义：
1 活性单位(U) 是指在 50 μl 反应体系中，50℃ 1 h 内完全酶切1 µg λDNA 所需的酶量。
产品组成：

质量控制：
超长时间温育检测 ：
最适反应温度下，将 10 U BspQI 与 1 μg λDNA 共同温育 3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，延时酶切可能出现星号活性。
酶切-连接-再酶切检测：
最适反应温度下，使用10 U BspQI消化底物，回收酶切产物。在22℃下使用适量T4 DNA Ligase (Fast)可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
DNase 残留检测：
将10 U BspQI与双链DNA底物在 37℃温育 16 h，通过 DNA电泳检测双链DNA底物无变化。