无细胞蛋白表达试剂盒

        本试剂盒采用的是大肠杆菌无细胞蛋白表达系统，它是目前应用最广泛的无细胞蛋白表达系统，因其遗传背景清楚，目的基因表达水平高，培养周期短，效率高，成本低，抗污染能力强，易于放大，并且可以适用于多种属蛋白的表达，因此广泛应用于蛋白质互作、高通量筛选、基因电路等前沿研究领域。
        它可通过质粒或线性模板实现目的蛋白质的快速、高效表达，试剂盒采用转录和翻译偶联的方法，通过“一锅式”反应表达目的蛋白。试剂盒中提供的无细胞反应体系除目的蛋白基因外，含有体外转录和翻译所需的全部酶、能量、氨基酸、核苷酸、无机盐等，操作简便，表达效率高、反应条件可控、蛋白产量高、产物易分离、无细胞毒害作用等诸多优点，适用于多种蛋白的体外表达。
产品特点：
1、快速：只需要 2-16 h即可完成目的蛋白合成；
2、模板灵活：支持线性模板、质粒模板以及 PCR 产物；
3、表达量高：最高可实现 3mg/mL 以上产率的蛋白制备；
4、蛋白共表达：可在同一反应中进行多目的蛋白的同时表达；
5、操作简单：将反应组分与模板混合即可制备蛋白；
6、高通量：反应也可在 96 孔板中进行，当检测到阳性表达后，可进行体系放大；
7、适用蛋白种类多：可表达各种类型的蛋白，包括富含二硫键的蛋白、膜蛋白等。
对照质粒图谱：


起始密码子上游序列 5’→3’：
ACTTT AAGAA GGAGA TATAC ATATG
终止密码子下游序列 5’→3’：
TGAGT CGACC GGCTG CTAAC AAAGC
注意：使用本试剂盒前
1、 如果您使用本试剂盒提供的质粒 DNA 模板构建目的基因表达载体，为了正确表达，所有模板必须包含T7 启动子、起始密码子和目的基因上游的原核生物核糖体结合位点(RBS)
2、如果您设计自己的表达载体，我们建议生成一个包含以下元素的 DNA 模板（如下图所示）
（1）目的基因位于 T7 启动子和核糖体结合位点(RBS)的下游，必须包含一个 ATG 起始密码子和一个终止密码子，在 RBS和 ATG 起始密码子之间的 7-9 nt 的序列，以获得目标蛋白的最佳翻译效率。这个顺序不必是特定的。
（2）目的基因T7 启动子上游含有至少 6-10 个核苷酸(nt)的序列，可有效结合启动子(线性 PCR 产物所必需的)；这个顺序不必是特定的，跟随 T7 启动子的序列包含至少 15-20 nt，形成潜在的茎环结构。
（3）一个位于目的基因下游 4-100nt 的 T7 终止子可以有效地终止转录并保持信息的稳定性。