NHS预活化填料

本产品是在琼脂糖凝胶微球骨架表面修饰十个原子长度的间隔臂后，再用N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化羧基形成的预活化填料。NHS活化基团可与抗体、蛋白、酶、多肽等含伯胺的功能性生物大分子偶联形成稳定的酰胺键，得到的亲和层析分离介质可特异性结合目标分子，一步纯化即可获得高纯度产物，因而NHS预活化填料广泛应用于科研和生产领域。

1、如果配基的稳定性不了解，可以选择不同pH的缓冲液和温度，不加填料模拟偶联条件，观察溶液是否会产生沉淀。沉淀将影响偶联效果，可以降低pH或温度，同时可以加5%左右的甘油或PEG保护蛋白，避免产生沉淀。

2、偶联的缓冲液可以是碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐缓冲液，不能使用氨基的缓冲体系，如Tris-HCl缓冲液。

3、封闭的缓冲液一般使用带氨基的小分子试剂，如乙醇胺、Tris等，在pH 8~9、室温条件下数小时可封闭完全。

4、在偶联中尽量使用温和的混匀方式，如震荡、翻转、旋转等。如使用机械搅拌，需要降低搅拌的速度，只要把填料能混匀完全悬浮起来即可，避免剧烈搅拌使凝胶微球破碎或使蛋白变性。不可使用磁力搅拌。