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RIPA裂解液(弱)

RIPA裂解液(弱)

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商品描述

多种成分均可以从细胞中提取出总蛋白,如Triton、SDS、NP-40等。RIPA裂解液(弱)(Weak RIPA Lysis Buffer)是采用一种温和的裂解方法获得总蛋白的裂解液。所获得的蛋白质可以用于PAGE电泳,Western Blot,免疫沉淀(Immunol Precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)等。
Weak RIPA Lysis Buffer主要由Tris、NaCl、Triton等组成,用Weak RIPA Lysis Buffer得到的蛋白,可以用 BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。

应用
注意事项
1、去除贴壁细胞的培养液时,如果血清中的蛋白没有干扰,可以不用清洗。
2、如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。
3、如果细胞量较多,必须分装成 50~100 万细胞/离心管,然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
4、如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈 Vortex 使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
5、溶解 RIPA 裂解液时,应尽量缩短溶解时间,避免裂解液中的有效成分失效。
6、裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组 DNA 等的复合物。在不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如 NF-KB、p53 等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
7、细胞裂解的操作步骤,应置于冰上或 4℃进行。
8、为了您的安全和健康,请穿戴好个人防护装备和服装进行操作。
制备和贮存
保存方式
-20℃,有效期12个月。避免反复冻融,建议分装储存。
声明 :本官网所有报价均为常温或者蓝冰运输价格,如有产品需要干冰运输,需另外加收干冰运输费。
货号:
abs9230-100ml
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