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UA-Glo® Kinase ADP Assay with PI3K Substrate PIP2:3PS
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咨询UA-Glo® 激酶ADP检测试剂盒 (含PI3K底物PIP2:3PS) 组分和规格如下。可检测96-/384-孔板反应数按每孔25μL / 5μL激酶反应计算。
规格 | 组分 | 96-孔板反应数 | 384-孔板反应数 |
1,000 assays | PIP2:3PS (1mg/mL): 0.25mL 10x PIP2:3PS稀释缓冲液: 1mL MgCl2(1M): 1mL 5x PI3K激酶反应缓冲液: 1.5mL ATP去除试剂: 5mL ADP检测试剂: 10ml ATP (10mM):0.5mL ADP (10mM): 0.5mL | 200 | 1,000 |
10,000 assays | PIP2:3PS (1mg/mL): 10x0.25mL 10x PIP2:3PS稀释缓冲液: 5x1mL MgCl2 (1M): 1mL 5x PI3K激酶反应缓冲液: 15mL ATP去除试剂: 50mL ADP检测试剂: 100ml ATP (10mM): 5mL ADP (10mM): 5mL | 2,000 | 10,000 |
磷脂酰肌醇二磷酸（Phosphatidylinositol (4,5)-bisphosphate, PIP2)和磷脂酰肌醇三磷酸phosphatidylinositol (3,4,5)-trisphosphate , PIP3) 是磷脂酰肌醇 (PI) 衍生物。PIP2和PIP3通过动态磷酸化/去磷酸化参与多种细胞生理过程。磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）是通过磷酸化磷脂酰肌醇衍生物介导信号传导的关键酶类，其激活的PI3K/Akt信号通路在细胞增殖、代谢调控及免疫应答中发挥核心作用。一类磷脂酰肌醇-3-激酶 (PI3K Class I)通过磷酸化PIP2生成的PIP3可以参与生长因子受体介导的下游级联反应，其介导的信号异常与肿瘤发生发展的机制高度相关。
UA-Glo®激酶ADP检测试剂可以定量测定酶学实验中激酶的活性。该试剂通过定量检测激酶反应产物ADP的数量以确定激酶的活性： ADP的数量和激酶活性呈正相关。 使用UA-Glo®激酶ADP检测试剂时激酶反应中的ATP浓度最高可至1mM。该试剂盒可以检测多数激酶，激酶底物包括多肽，蛋白，脂或糖等。该试剂盒可用于激酶抑制物的高通量均相筛选，并可以通过调整ATP浓度区分ATP竞争性和非竞争性抑制物。该试剂盒也可以用于检测 任何产生ADP的酶的活性，例如ATPase.
UA-Glo® 激酶ADP检测试剂盒 (含PI3K底物PIP2) 包括激酶ADP检测试剂和优化的PI3K底物PIP2:3PS，可以用于PI3K (Class I) 抑制剂的高通量筛选。
干冰运输。收到试剂盒后，PIP2:3PS底物，ATP和ADP应-80℃避光储存，首次使用后应按需分装并于-80℃避光储存；ATP去除试剂和ADP检测试剂避光储存于-20℃及以下, 建议长期（>3个月）保存于-80℃，首次使用后应分装并于-20℃及以下避光储存。ATP去除试剂和ADP检测试剂反复冻融7次信号强度和功能无损失，放置于室温 (22℃) 24hr或4℃ 7天信号强度和功能无损失。5x PI3K激酶反应缓冲液，10x PIP2:3PS稀释缓冲液和MgCl2 -20℃及以下避光储存。试剂有效期见试剂瓶标签。