全部商品分类
UA-Glo® Glucose-Uptake Luminescence Detection Kit
用小程序，查商品更便捷
收藏
对比
咨询UA-Glo® 葡萄糖摄取发光法检测试剂盒组分和规格如下。可检测的96-孔板反应数按照每孔加入50 μL样品，25 μL终止缓冲液，25 μL中和缓冲液和100 μL 2DG6P检测试剂计算。
规格 | 组分和规格 | 96-孔板反应数 |
5ml | 终止缓冲液：15 mL 中和缓冲液：15 mL 荧光素检测液：5 mL 还原酶底物：25 μL 2-脱氧葡萄糖 (2DG, 100mM)：250 μL 2DG6P (1mM)：50 μL | 50 |
10ml | 终止缓冲液：15 mL 中和缓冲液：15 mL 荧光素检测液：10 mL 还原酶底物：50 μL 2-脱氧葡萄糖 (2DG, 100mM)：250 μL 2DG6P (1mM)：50 μL | 100 |
50ml | 终止缓冲液：15 mL 中和缓冲液：15 mL 荧光素检测液：50 mL 还原酶底物：250 μL 2-脱氧葡萄糖 (2DG, 100mM): 250 μL 2DG6P (1mM)：50μL | 500 |
哺乳动物细胞的葡萄糖摄取可以通过检测细胞内产生的2-脱氧葡萄糖-6-磷酸 (2DG6P) 来测量。哺乳动物细胞葡萄糖代谢不会产生2DG6P，向细胞培养基中加入2-脱氧葡萄糖 (2DG) 后，2DG会被葡萄糖转运体转运入细胞并在细胞内快速被葡萄糖-6-磷酸酶磷酸化，生成2DG6P。细胞内的酶无法进一步修饰2DG6P，并且2DG6P的不可透膜性使其在细胞内聚集，因此通过检测细胞内2DG6P可以测量细胞对葡萄糖的摄取。
UA-Glo® 葡萄糖摄取发光法检测试剂盒通过葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，还原酶和荧光素酶的偶联反应检测2DG6P含量。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶作用于2DG6P使NAD还原为NADH，还原酶则利用NADH将还原酶底物 (也是荧光素前体) 还原为荧光素，最后荧光素经荧光素酶作用产生发光而被检测，其发光强度和2DG6P含量呈正比。试剂盒还包括终止缓冲液和中和缓冲液。终止缓冲液含有盐酸和去污剂，可以快速裂解细胞和终止细胞代谢，并且灭活细胞内的酶和降解还原型NAPD(P)H，如此处理后细胞内的酶和还原型NAPD(P)H就不会干扰后续的2DG6P检测。中和缓冲液则可提高pH值以利于2DG6P检测试剂的反应。
UA-Glo® 葡萄糖摄取发光法检测试剂盒为均质型检测试剂，具有信噪比高、重复性好、稳定性好的特点，适合样品的批量处理。
干冰运输。避光储存于-80℃，有效期见试剂瓶标签。初次使用后建议将试剂按需分装避光-80℃保存。荧光素检测液和还原酶底物冻融不超过3次。终止缓冲液和中和缓冲液可保存于4℃。