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细胞凋亡 DNA Ladder 抽提试剂盒


品牌: Absin








产品介绍
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产品信息
商品描述
细胞核染色质 DNA 断裂是细胞凋亡的标志特征。在细胞发生凋亡时,核酸内切酶被激活,选择性降解染色质 DNA,形成 50-300 kb 的大片段,并进而在核小体连接处断裂,形成 180-200 bp 或其整倍数的 DNA片段,这些 DNA 片段可从细胞中提取出来,通过琼脂糖凝胶电泳,溴化乙啶染色呈现为梯状条带(DNA Ladder),并据此判断细胞凋亡产生。
本试剂盒可应用于多种样本进行 DNA Ladder 检测的样本前处理,可以非常有效地抽提最小片断为180-200 bp 的 DNA Ladder。
产品组成:
组分 | 50T | 保存 |
Lysis Buffer | 2.5mL | 2-8℃ |
Enzyme A | 0.25mL | -20℃ |
Enzyme B | 0.25mL | -20℃ |
醋酸氨溶液 | 2mL | 2-8℃ |
1×TE Buffer | 6mL | 2-8℃ |

应用
注意事项
1、整盒-20℃保存,一年有效,醋酸铵溶液和 1× TE buffer 也可以室温保存。
2、对于凋亡诱导的细胞,注意收集细胞培养液上清中漂浮的细胞。
3、DNA Ladder 出现在细胞凋亡晚期,观察细胞形态已发生皱缩出芽,染色质完全凝聚,细胞核已固缩断裂的凋亡晚期形态,建议该种形态的凋亡细胞比例在 30%以上时进行 DNA Ladder 检测或先进行 TUNEL 检测。
4、大部分细胞发生凋亡时,可以观察到典型的 DNA Ladder。但 DNA Ladder 出现在一个较短的时间段,在凋亡早期取样,无 DNA 降解条带,而在凋亡末期取样则产生与细胞坏死相似的 DNA 弥散条带。因此取样时间需根椐不同种类的细胞和诱导剂而摸索确定。
5、某些细胞不产生这种核小体间的 DNA 断裂,而是产生 50-300 kb 的大片段断裂。
6、电泳时一定要用新鲜配制的电泳液,DNA 琼脂糖凝胶也要新鲜配制。
7、DNA 凝胶电泳时为获取最佳的电泳效果使 DNA Ladder 充分分开,电泳速度宜适当慢一些,选择低电压进行电泳,选用制备的凝胶长度宜适当长一些,而加样孔宜更加扁平一些。选取适当较薄的梳齿,往往会获得更好的 Ladder 电泳效果。
8、温度较低时 Lysis Buffer 中可能会有沉淀产生,属正常现象。如有沉淀,56℃水浴孵育溶解沉淀,混匀后使用。
9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、对于凋亡诱导的细胞,注意收集细胞培养液上清中漂浮的细胞。
3、DNA Ladder 出现在细胞凋亡晚期,观察细胞形态已发生皱缩出芽,染色质完全凝聚,细胞核已固缩断裂的凋亡晚期形态,建议该种形态的凋亡细胞比例在 30%以上时进行 DNA Ladder 检测或先进行 TUNEL 检测。
4、大部分细胞发生凋亡时,可以观察到典型的 DNA Ladder。但 DNA Ladder 出现在一个较短的时间段,在凋亡早期取样,无 DNA 降解条带,而在凋亡末期取样则产生与细胞坏死相似的 DNA 弥散条带。因此取样时间需根椐不同种类的细胞和诱导剂而摸索确定。
5、某些细胞不产生这种核小体间的 DNA 断裂,而是产生 50-300 kb 的大片段断裂。
6、电泳时一定要用新鲜配制的电泳液,DNA 琼脂糖凝胶也要新鲜配制。
7、DNA 凝胶电泳时为获取最佳的电泳效果使 DNA Ladder 充分分开,电泳速度宜适当慢一些,选择低电压进行电泳,选用制备的凝胶长度宜适当长一些,而加样孔宜更加扁平一些。选取适当较薄的梳齿,往往会获得更好的 Ladder 电泳效果。
8、温度较低时 Lysis Buffer 中可能会有沉淀产生,属正常现象。如有沉淀,56℃水浴孵育溶解沉淀,混匀后使用。
9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

制备和贮存
保存方式
-20℃,有效期12个月。
声明 :本官网所有报价均为常温或者蓝冰运输价格,如有产品需要干冰运输,需另外加收干冰运输费。