EdU-488 细胞增殖检测试剂盒（细胞/组织通用）

        细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。直接测定 DNA 的合成是检测细胞增殖最精确的方法之一，传统使用 BrdU 方法测定 DNA 的合成。BrdU 方法测定 DNA 合成需要 DNA 变性（如酸变性、热变性或者用 DNase 消化）去暴露 BrdU，从而方便 BrdU 抗体结合。
        EdU（5-ethynyl-2’-deoxyuridine，5-溴-2-脱氧尿嘧啶）则是一种嘧啶类似物，可以在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 检测法是基于一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃的原子共价反应，即“点击反应”。EdU标记增殖快速有效，易于使用，只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU，是 BrdU 方法的革命性突破。
        本试剂盒中，EdU 试剂含有炔烃，而 Fluor488 染料试剂含有叠氮化合物。只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU。
        经本试剂盒处理后，增殖的细胞在荧光显微镜下呈现非常明亮的绿色荧光，可以用于荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪检测。荧光显微镜适用于细胞样本及组织切片，流式细胞仪或荧光酶标仪检测仅适用于细胞样品，不适用于组织切片。
产品组分：

组分	名称	50T	200T	保存
组分A	10 mM EdU	0.4 mL	2×1 mL	-20℃
组分B	Flour488-azide	85 μL	340 μL	-20℃，避光
组分C	CuSO4	1.1 mL	4.4 mL	2-8℃
组分D	Click-iT EdU 缓冲液添加物	55 mg	220 mg	2-8℃
组分E	10× Click-iTEdU 反应缓冲液	2.5 mL	10 mL	2-8℃
组分F	Hoechst33342	25 μL	100 μL	2-8℃

注：
1、针对12孔板培养的细胞，每个样品的反应体系为500 μL的 Click反应液；50T可以提供50个反应的量；200T 可以提供 200 个反应的量。不同器皿培养的细胞所对应的具体反应体系用量可参考表 1。
2：针对组织切片，每个样品的反应体系为 200 μL 的 Click 反应液；50T 可以提供 125 个反应的量；200T 可以提供 500 个反应的量。
3：Fluor488-azide: Ex/Em=495/520 nm；Hoechst 33342: Ex/Em=350/461 nm, bound to DNA。
表 1 EdU 培养基及染色反应液的使用量参考

	96孔板	48孔板	24孔板	12孔板	6孔板	5.5 cm 皿
EdU 培养基	100uL	150uL	200uL	500uL	1mL	2mL
染色反应液	100uL	150uL	200uL	500uL	1mL	2mL

1、组份 B：Flour488-azide，应-20°C 避光保存。按说明书指定方法稳定保存可有效放置一年。
2、此试剂盒适用荧光光谱为：Flour488-azide: Ex/Em=495/520 nm；Hoechst 33342: Ex/Em=350/461
nm, bound to DNA。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。