EdU-488/PI 细胞增殖检测试剂盒（流式）

        细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。直接测定 DNA 的合成是检测细胞增殖最精确的方法之一，传统使用 BrdU 方法测定 DNA 的合成。BrdU 方法测定 DNA 合成需要 DNA 变性（如酸变性、热变性或者用 DNase 消化）去暴露 BrdU，从而方便 BrdU 抗体结合。
        EdU（5-ethynyl-2’-deoxyuridine，5-溴-2-脱氧尿嘧啶）则是一种嘧啶类似物，可以在 DNA 合成期整合入 DNA 双链。EdU 检测法是基于一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃的原子共价反应，即“点击反应”。EdU标记增殖快速有效，易于使用，只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的 EdU，是 BrdU方法的革命性突破。
        EdU 法细胞增殖检测试剂盒中，EdU 试剂含有炔烃，同时 Fluor488 染料试剂含有叠氮化合物。从而达到便捷、高效、灵敏检测到增殖细胞的效果。该试剂盒也可和细胞周期检测试剂盒配套使用，通过流式细胞术可以直接测定出合成期的细胞比例，避免 PI 单独染色分析时的主观估计，能更好地反映细胞的合成期情况。
产品组分：

组分	名称	20T	100T	保存
组分A	10 mM EdU	0.8mL	4×1mL	-20℃
组分B	Flour488-azide	20uL	100uL	-20℃，避光
组分C	CuSO4	400uL	2mL	2-8℃
组分D	Click-iT EdU 缓冲液添加物	100mg	100mg	2-8℃
组分E	Click-iT Reaction Buffer	10mL	50mL	2-8℃
组分F	RNase A	1mL	5mL	-20℃
组分G	PI 染色液	5mL	25mL	2-8℃，避光

注 1：对 6 孔板培养的细胞或者一个 500 μL 的标准流式反应体系，20T 可以提供至少 20 管反应的量；100T是可以提供 100 管反应的大包装。不同器皿培养的细胞所对应的具体反应体系用量可参考表1。
注 2 Flour488-azide: Ex/Em = 495/520 nm；PI: Ex/Em = 488/617 nm。
表 1 EdU 培养基及染色反应液的使用量参考

	96孔板	48孔板	24孔板	12孔板	6孔板	5.5 cm 皿
EdU 培养基	100uL	150uL	200uL	500uL	1mL	2mL
染色反应液	100uL	150uL	200uL	500uL	1mL	2mL

1、组份 B：Flour488-azide，应-20°C 避光保存。按说明书指定方法稳定保存可有效放置一年。
2、此试剂盒适用荧光光谱为：Flour488-azide：Ex/Em = 495/520 nm。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4、流式细胞仪检测时，细胞数量不应低于 1×10⁵个/mL，不推荐用于检测组织样本。