活性氧ROS检测试剂盒（绿色荧光）

1、阳性对照 Rosup 一般使用浓度为 100 μM（推荐浓度 100-400 μM，具体依细胞类型而定）。通常刺激后 30 min-4 h 可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后 30 min 内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果活性氧升高得过快，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。
2、实验过程中，如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照 1:2000-1:5000 稀释 DCFH-DA，使 DCFH-DA 的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间也可以根据情况在 15-60 min 内适当进行调整。
3、活性氧阳性对照（Rosup）仅仅用于作为阳性对照的样品，并不是在每个样品中都需加入活性氧阳性对照。
4、探针装载后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。

ROS 活性氧检测试剂盒