全血RNA快速提取试剂盒(含Dnase I)

全血RNA快速提取试剂盒(含Dnase I)

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品牌: Absin
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    反应种属:
    Human;Mouse;Rat;
    Human;Mouse;Rat;
    产品介绍
    产品信息
    商品描述

    红细胞裂解液选择性裂解红细胞,然后独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解白细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase free H20将RNA从硅基质膜上洗脱。
    产品特点:
    1、重复性好,柱与柱之间吸附量差异极小。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
    2、操作安全,不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤.。
    3、简便快捷,单个样品操作一般可在40分钟内完成。
    自备试剂:β-巯基乙醇、无水乙醇
    产品信息:

    组分保存50次
    10×RLB(RNase-free)室温25ml
    裂解液 RLT室温50ml
    去蛋白液 RW1室温40ml
    漂洗液 RW室温10 ml(第一次使用前加入 40 ml 无水乙醇)
    DNase I-20℃500ul
    缓冲液 RDD-20℃1 ml×4
    RNase-free H2O室温10ml
    70%乙醇室温9 ml RNase-free H2O(第一次使用前加入 21 ml 无水乙醇)
    RNase-free 吸附柱 RA室温50个
    收集管室温50个
    RNase-free 离心管 1.5 ml室温50个
    应用
    反应种属
    Human;Mouse;Rat;
    注意事项
    1、第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
    2、需要自备一次性注射器。
    3、裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮 肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
    4、关于DNA的微量残留: 由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数 RT-PCR 扩增过程中极其微量的 DNA 残留(一般电泳 EB 染色紫外灯下观察不可见) 影响不是很大,如果要进行严格的 mRNA 表达量分析如荧光定量 PCR,我们建议在进 行模板和引物的选择时:
    (1)选用跨内含子的引物,这样 DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
    (2)选择基因组 DNA 和 cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
    5、RNA 纯度及浓度检测:
    完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳 (电泳条件:胶浓度 1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲 液;150V,15 min)检测完整性。由于细胞中 70%-80%的 RNA 为 rRNA,电泳后 UV 下应能看到非常明显的 rRNA 条带。动物 rRNA 大小分别约为 5 kb 和 2 kb,分别相当 于 28S 和 18S rRNA。动物 RNA 样品中最大 rRNA 亮度应为次大 rRNA 亮度的 1.5-2.0 倍,否则表示 RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
    纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的 RNA,OD260/OD280 读数(10 mMTris, pH7.5)在 1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的 pH 值 影响。同一个 RNA 样品,假定在 10 mM Tris,pH7.5 溶液中测出的 OD260/OD280 读数 1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在 1.5-1.9 之间,但这并不表示 RNA 不纯。
    浓度:取一定量的 RNA 提取物,用 RNase-free 水稀释 n 倍,用 RNase-free 水将分光 光度计调零,取稀释液进行 OD260,OD280测定,按照以下公式进行 RNA 浓度的计算: 终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数 n)×40
    制备和贮存
    保存方式
    DNase I 和缓冲液 RDD -20℃保存,其它试剂室温保存,有效期12个月,详细信息详见各组分清单。

    参考图片

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    货号:
    abs60029-50T
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