快速内切酶RsaI

        快速内切酶是一系列经过基因工程重组的快速限制性内切酶，适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。所有快速内切酶在通用的 CutOne  或 CutOne  Color  Buffer 中都具有优良的活性，能够在 5~15 分钟内完成酶切。此外，去磷酸化、连接试剂在 CutOne Buffer 中均具有 100% 活性， 支持一管化反应，提升“酶切 - 修饰 - 连接”的体验。
        CutOne  Color Buffer 包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。CutOne  Color Buffer 的红色染料与 2500 bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与 10  bp 双链 DNA 片段在 1% 琼脂糖凝胶中迁移速率接近。
识别位点：
5‘...G T ↓ A C...3‘
3‘...C A ↑ T G...5‘
产品组成：

建议反应条件:
1 × CutOne 缓冲液；
37℃温育；
参照“DNA 快速酶切流程”配制反应体系。
失活条件：
80℃温育 20 min。

质量控制：
功能活性检测
37℃下，在 20 μl 通用 CutOne 反应体系中，1 μl RsaI 能够在 15 min 内完全消化 1 μg λDNA。
超长时间温育检测
37℃下，在 20 μl 通用 CutOne  反应体系中，将 1 μl  RsaI 与 1 μg λDNA 共同温育 3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解。更长时间酶切可能出现星号活性。
酶切 - 连接 - 再酶切检测
37℃下，使用 10 倍酶量的 RsaI 消化 DNA 底物，  回收酶切产物，在 22 ℃ 下使用 T4 DNA Ligase (Fast) 可以将超过 75% 的酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后， 使用相同的内切酶可以重新切开 90% 以上的连接产物。