SMAD3 (C67H9) Rabbit mAb
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SMAD3 (C67H9) Rabbit mAb

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    分子量:
    52
    52
    反应种属:
    Human,Mouse,Rat,Monkey,
    Human,Mouse,Rat,Monkey,
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    产品介绍
    产品信息
    抗原名称
    Smad3
    来源纯化
    使用与 SMAD3 的氨基末端残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
    宿主
    Rabbit
    简单描述
    Monoclonal Antibody for studying Smad3. Cited in 606 publications. Validated for WB, IP, IF, F, ChIP, ChIP. Available in 2 sizes. Highly specific and rigorously validated in-house, SMAD3 (C67H9) Rabbit Monoclonal Antibody (CST #9523) is ready to ship.
    商品描述

    Product Usage Information

    For optimal ChIP and ChIP-seq results, use 10 μl of antibody and 10 μg of chromatin (approximately 4 x 106 cells) per IP. This antibody has been validated using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits.

    ApplicationDilution
    Western Blotting1:1000
    Immunoprecipitation1:100
    Immunofluorescence (Immunocytochemistry)1:100 - 1:200
    Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized)1:100
    Chromatin IP1:50
    Chromatin IP-seq1:50
    分子量
    52
    内毒素水平
    非洲爪蟾蜍, 斑马鱼 , 牛
    研究领域
    癌症,发育生物学与干细胞研究,纤维化,神经科学,
    应用
    反应种属
    Human,Mouse,Rat,Monkey,
    预测反应种属
    Xenopus,Zebrafish,Bovine,
    目标/特异性

    Specificity/Sensitivity

    SMAD3 (C67H9) Rabbit mAb 可检测 SMAD3 总蛋白的内源水平。未检测到与其他家族成员具有交叉反应性。

    物种反应性:

    人, 小鼠, 大鼠, 猴

    敏感性
    Endogenous
    背景
    背景
    信号转导分子 SMAD 家族的成员是关键胞内通路的组分,可将 TGF-β 信号从细胞表面传递到胞核。已界定三个不同类别的 SMAD:受体调节的 SMAD (R-SMAD),包括 SMAD1、2、3、5 和 9;常见转导介质 SMAD (co-SMAD)、SMAD4;以及拮抗性或抑制性 SMAD (I-SMAD)、SMAD6 和 7 (1-5)。活化型 I 受体与特异性 R-SMAD 有关,并且可在保守的羧基末端 SSXS 基序上对其进行磷酸化。磷酸化的 R-SMAD 从受体上分离,并与 SMAD4 形成一个异聚复合体,从而启动异聚 SMAD 复合体向胞核的移位。一旦进入胞核,SMAD 就会募集多种 DNA 结合蛋白来调节转录活性 (6-8)。在受到 TGF-β 刺激后,Smad2 和 Smad3 在其羧基末端(Smad2 的 Ser465 和 467;Smad3 的 Ser423 和 425)被 TGF-β 受体 I 磷酸化。磷酸化的 Smad 2/3 与 Smad4 构成复合体,并转位到胞核调节基因表达 (9-11)。 1.Heldin, C.H. et al. (1997) Nature 390, 465-71. 2.Attisano, L. and Wrana, J.L. (1998) Curr Opin Cell Biol 10, 188-94. 3.Derynck, R. et al. (1998) Cell 95, 737-40. 4.Massagué, J. (1998) Annu Rev Biochem 67, 753-91. 5.Whitman, M. (1998) Genes Dev 12, 2445-62. 6.Wrana, J.L. (2000) Sci STKE 2000, re1. 7.Attisano, L. and Wrana, J.L. (2002) Science 296, 1646-7. 8.Moustakas, A. et al. (2001) J Cell Sci 114, 4359-69. 9.Abdollah, S. et al. (1997) J. Biol. Chem. 272, 27678-27685. 10.Souchelnytskyi, S. et al. (1997) J. Biol. Chem. 272, 28107-28115. 11.Liu, X. et al. (1997) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 10669-10674.
    研究领域
    癌症,发育生物学与干细胞研究,纤维化,神经科学,
    翻译后修饰
    Unmodified
    制备和贮存
    保存方式
    Supplied in 10 mM sodium HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg/ml BSA, 50% glycerol and less than 0.02% sodium azide. Store at –20°C. Do not aliquot the antibody.
    数据库链接
    Entrez-Gene ID
    4088
    UniProt ID
    P84022

    参考图片

    Western blot analysis of extracts from HT1080 (human), C2C12 (mouse) and B35 (rat) using Smad3 (C67H9) Rabbit mAb.

    使用Smad3 (C67H9) Rabbit mAb兔单抗对HT1080 (人), C2C12 (小鼠)和B35 (大鼠)细胞提取物进行western blot分析。

    Western blot analysis of extracts from HT1080 cells, treated with TGF-β1, TGFR inhibitor SB-431542 or BMP-2, using Phospho-Smad3 (Ser423/425) (C25A9) Rabbit mAb #9520 (upper) or total Smad3 (C67H9) Rabbit mAb #9523 (lower).

    使用Phospho-Smad3 (Ser423/425) (C25A9)Rabbit mAb兔单抗#9520 (上)或 total Smad3 (C67H9) Rabbit mAb兔单抗 #9523 (下)对经过 TGF-β1, TGFR 抑制因子 SB-431542 或BMP-2处理后的HT1080细胞提取物进行western blot分析。

    Confocal immunofluorescent analysis of HT1080 cells, untreated (left) or TGFβ-treated (right), using Smad3 (C67H9) Rabbit mAb (green). Actin filaments have been labeled with Alexa Fluor® 555 phalloidin (red).

    使用Smad3 (C67H9) 兔单抗(绿色)对处理(左)或 TGFβ-处理(右)的HT1080细胞进行激光共聚焦荧光分析。使用DY-554 phalloidin(红色)标记肌动蛋白丝。

    Flow cytometric analysis of HT-1080 cells using Smad3 (C67H9) Rabbit mAb #9523 (blue) compared to a nonspecific negative control antibody (red).

    使用Smad3 (C67H9) Rabbit mAb兔单抗 #9523 对Ht-1080细胞进行流式细胞分析,使用非特异性抗体做为阴性对照(红色)。

    Chromatin immunoprecipitations were performed with cross-linked chromatin from 4 x 106 HaCaT cells treated with Human TGF-β3 #3706 (7 ng/ml) for 1 h and either 10 μl of Smad3 (C67H9) Rabbit mAb or 2 μl of Normal Rabbit IgG #2729 using SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003. The enriched DNA was quantified by real-time PCR using SimpleChIP® Human CDKN1A Intron 1 Primers #4669, SimpleChIP® Human ID1 Promoter Primers #5139, and SimpleChIP® Human α Satellite Repeat Primers #4486. The amount of immunoprecipitated DNA in each sample is represented as signal relative to the total amount of input chromatin, which is equivalent to one.

    使用SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) #9003对经过人TGF-β3 #3706 (7 ng/ml)处理的4 x 106 HaCaT细胞和10μl Smad3 (C67H9)Rabbit mAb兔单抗或2 μlNormal Rabbit IgG#2729进行染色质免疫共沉淀。富集到的DNA使用人CDKN1A内含子1引物#4669, SimpleChIP® 人ID1启动子引物#5139,人SMAD6启动子引物和SimpleChIP®人α Satellite Repeat引物#4486进行荧光实时PCR定量。各样品沉淀得到的DNA量比对于nput染色质量进行相对定量,Input的染色质量设定值为1。

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    货号:
    9523T
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