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Features
- 结合能力提高三倍（高达 9 mg/ml）
- 从原核和真核系统中进行纯化的理想选择
- 可在任何液相色谱系统上进行自动纯化
- 对蛋白结构、功能和免疫原性的影响极小
Product Details
小型 Strep-tag II (WSHPQFEK) 可用于在 Strep-Tactin 树脂上对活性原生构象蛋白进行高纯度纯化。此外，它还可以与 His 标签结合使用，进行标准化的两步纯化程序。Strep-Tactin 可作为 Superflow 色谱树脂用于更大规模的纯化（高达 9 mg/ml 树脂）。此外，Strep-Tactin 树脂还提供预装试剂盒形式，用于在液相色谱系统上进行自动纯化。
Performance
Strep-Tactin Superflow Plus 可以高效纯化蛋白（见图： 使用 Strep-Tactin Superflow Plus 高效纯化 Strep 标签 GFP 和 在任何表达系统中高度特异性地检测 Strep 标签蛋白）。
同时，pQE TriSystem His Strep TriSystem Vectors 可用于表达带有 His 和 Strep 双标签的蛋白，这些蛋白是通过两步亲和程序纯化的。Ni-NTA 和 Strep-Tactin 顺序纯化步骤为标准化步骤，速度很快，可产出超纯蛋白。
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Principle
Strep 标签蛋白以高亲和力和特异性结合 Strep-Tactin，后者是链霉亲和素的一种工程形式（见表“Strep-Tactin 基质的蛋白结合能力”）。洗涤后，使用低浓度的生物素（链霉亲和素的天然配体）或去硫生物素（一种稳定、可逆结合的生物素类似物，见图 Strep 标签蛋白与 Strep-Tactin 的结合和使用脱硫生物素的洗脱）洗脱蛋白。用小型 Strep-tag II 标签蛋白，可以高效、标准化地纯化在原核和真核系统中表达的重组蛋白，并产出高纯度蛋白。此外，在其他标记可能不适用的情况下，如 EDTA 等缓冲添加剂可能会剥离 IMAC 柱时，Strep-tag II 是首选系统。
| 基质 | 蛋白结合能力 |
| Strep-Tactin Superflow Plus | 最多 9 mg/ml |
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Procedure
Strep 标签蛋白使用 pQE TriSystem Vector 表达，并按照 Strep-Tactin Superflow Plus 亲和纯化程序从细胞裂解物中以很高的纯度获取。Strep 标签蛋白可采用批量或重力流方法进行纯化，也可在 FPLC 兼容柱中填充 Strep-Tactin Superflow Plus，然后在液相色谱系统上进行纯化。Strep-Tactin Superflow Plus 有 5 ml 试剂盒形式可选，用于在 FPLC、ÄkTA 和 BioLogic 系统等液相色谱系统上进行自动纯化，或使用注射器进行手动纯化。有关与 Strep-Tactin 树脂兼容的试剂，见表“与 Strep-tag Strep-Tactin 相互作用兼容的试剂”。
| 非离子洗涤剂 | 离子和齐聚物洗涤剂 | 还原剂 | 其他 | 盐 |
| 2% Triton X-100 | 2% 十二烷基肌氨酸钠 | 50 mM DTT | 25% 甘油 | 5 M 氯化钠 |
| 2% 吐温 20 | 0.1% SDS | 2 M 氯化铵 | ||
| 2% N-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 | 1.3% N-辛基-2-羟基乙基亚砜 | 1 M 氯化钙 | ||
| 0.2% N-壬基-β-D-吡喃葡萄糖苷 | 0.3% CHAPS | |||
| 2% Igepol CA-630 (Nonidet P40) | 0.1% N-十二烷基-N,N-二甲胺-N-氧化物 | 1 M 胍 | ||
| 0.12% C10E5；癸基五氧乙烯 | 0.034% DDAO；N-癸基-N,N-二甲胺-N-氧化物 | 1 mM 苯甲基磺酰氟 (PMSF) | ||
| 0.03% C10 E6 | 10% 乙醇 | |||
| 0.005% C12 E8 | ||||
| 0.023% C12E9；十二烷基壬氧乙烯 (Thesit) | ||||
| 0.35% DM；癸基-β-D-麦芽糖苷 | ||||
| 0.007% LM；N-十二烷基-β-D-麦芽糖苷 |
C 端的标签位置可确保只纯化全长蛋白。 纯化过程可重现性高，可确保每次都能制备出同样优质的蛋白。单克隆 Strep-tag 抗体用于在免疫检测程序中以高灵敏度和特异性检测 Strep 标签蛋白。
Applications
Strep-Tactin Superflow Plus 可用于以可重现的方式高效纯化 Strep 标签蛋白，效率高达每 ml 树脂可纯化 9 mg Strep 标签蛋白。纯化的蛋白可用于：
- 功能或相互作用研究
- 结晶筛选
- 结构分析
- 生成抗体