常用的消化酶一览
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按照酶解能力做排序
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问题：含EDTA胰酶经常用来消化贴壁细胞，但是在凋亡Annexin V染色中，为何推荐尽量避免使用胰酶呢？
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EDTA离子螯合剂影响染色
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Binding Buffer中含钙离子，由于Annexin V和磷脂酰丝酸结合时需要钙离子，所以Binding Buffer有利于Annexin V和磷脂酰丝氨酸的结合。
不推荐含有EDTA的胰酶去消化贴壁细胞，是因为它能够与Ca钙离子结合，从而影响AV与PS的结合。
如使用含EDTA的胰酶，需用PBS清洗，但在消化过程中仍会对细胞造成一定损伤，并且会降解Annexin V, FITC结合物，导致结果误差，因此尽可能使用不含有EDTA的胰酶消化样品细胞
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对实验数据的影响
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样本：UM-SCC-12肿瘤细胞系
酶的选择4种：1× TrypLE , Accutase, 0.25% Trypsin，Accumax.
消化时间&温度：37°C for 5 min
实验：Annexin FITC+7-AAD双色凋亡染色
(左) TrypLE and (右) Trypsin两种酶得到的凋亡实验结果
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细胞活力和凋亡比例的区别
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TrypLE对应的样本，有较高的细胞活力，Acctuase对应的样本，有较高的凋亡比例。
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针对Accutase，你了解哪些？
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