一、实验思路框架
| 样本来源类型 | 外周血PBMC |
| 检测指标 | 33 |
| 流式仪器型号 | BD FACSymphony™ A5 SE |
| 靶标细胞亚群 | T细胞（CD4+、CD8+、TCRγδ+）、B细胞（CD19+）、NK细胞（CD56+）、树突细胞（CD303+、CD123+）、单核细胞 |
二、配色方案
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三、圈门逻辑
1、预筛选门：
CD45+：圈选所有白细胞，排除碎片和非造血细胞。
排除7-AAD+：去除死细胞。
排除双联体（Doublets）：通过FSC-A/FSC-H或FSC-W/FSC-H排除。
2、主要细胞群分选：
T细胞：CD3+ → 细分CD4+、CD8+、TCRγδ+。
3、亚群：
初始/记忆：CD45RA+ vs. CD45RO+、CD62L+（中央记忆TCM）。
Treg：CD25+CD127low。
Tfh：CD185(CXCR5)+CD45RA-。
B细胞：CD19+ → 细分CD27-IgD+（初始B）、CD27+CD20-（浆母细胞）。
NK细胞：CD3-CD56+ → 细分CD16+（成熟NK）、CD57+（终末分化NK）。
树突细胞（DCs）：HLA-DR+CD3-CD19-CD14- → 细分CD303+CD123+（pDC）、CD11c+（cDC）。
单核细胞：CD14+。
4、高维分析：
使用UMAP和FlowSOM进行无监督聚类，结合标志物表达注释细胞亚群
四、流式结果图
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参考文章
High-parameter multicolor flow cytometry to identify and characterize specific T, B, NK and dendritic subpopulations in peripheral blood
