1.1 Human 卵巢肿瘤组织中CD8+TIL分选实验思路框架

理解肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）群体的异质性及人类癌症的免疫生物学特性，建立从人类肿瘤中分离 CD8⁺TIL 并通过单细胞免疫谱分析和多组学技术对其进行表征的方案，为高效免疫疗法的开发提供依据。

主要为人类卵巢肿瘤组织，也适用于肺癌、 cutaneous T 细胞淋巴瘤等其他人类肿瘤。

从冷冻人卵巢肿瘤组织解离制备单细胞悬液，经裂红、过滤富集后，通过抗体标记（CD45/CD3/CD8/CD69/CD103）的流式分选特异性分离CD8⁺ TRM（组织驻留记忆T细胞）和再循环T细胞亚群。

再调整细胞浓度用于单细胞RNA-seq+VDJ或多组学（Multiome）测序建库。

1、中等。关键难点在于维持细胞活力，需快速处理样本、严格控制离心温度和时间等；

2、数据分析涉及多组学数据整合，需掌握相关生物信息学工具和方法。