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1.2 Human 卵巢肿瘤组织中CD8+TIL分选所需材料清单

1.1 Human 卵巢肿瘤组织中CD8+TIL分选实验思路框架 | 1.3 肿瘤样本处理与单细胞悬液制备

实验步骤

  • 1
  • 2
  • 3
  • 1

    实验室耗材

    产品名称 品牌/型号 用途
    细胞培养皿 Absin(#abs7006) 细胞培养
    70um筛网 Absin(#abs7232 过滤组织碎片与结团细胞
    15 mL 锥形离心管 Absin(#abs7102) 离心分离细胞、溶液等
    50 mL 锥形离心管 Absin(#abs7100) 离心分离细胞、溶液等
    1.5 mL Eppendorf 管 Absin(#abs7119) 储存少量生物样品、试剂等
    一次性血清移液管(5 mL) Absin(#abs7052) 准确移取液体,用于细胞培养、试剂添加等
    一次性血清移液管(10 mL) Absin(#abs7053) 准确移取液体,用于细胞培养、试剂添加等
    一次性血清移液管(25 mL) Absin(#abs7054) 准确移取液体,用于细胞培养、试剂添加等
    圆底聚苯乙烯试管 Absin(#abs7303) 细胞培养、储存细胞悬液等
    BD FACSAria™ III 细胞分选仪 BD Biosciences 根据细胞表面标志物等特征分选细胞
    Cellometer K2 仪器 VWR,Cat# NEXCMK2 细胞计数、分析细胞活力等

     

  • 2

    试剂与缓冲液

    产品名称 品牌/型号 用途
    RPMI 1640 培养基 Absin (#abs9484) 细胞培养和缓冲液配制
    胎牛血清(FBS) Absin(#abs972) 补充细胞培养所需生长因子、激素等营养成分
    青霉素-链霉素 Absin (#abs9244) 细胞培养抗生素
    L - 谷氨酰胺 Absin(#abs9141) 细胞培养中提供氮源,参与细胞代谢
    丙酮酸钠 Absin(#abs44076143) 细胞培养中为细胞提供能量
    DMSO Absin(#abs9187) 细胞冷冻保护剂,降低冷冻过程对细胞的损伤
    HEPES(1 M) Absin(#abs42150994) 细胞培养缓冲剂,维持培养基 pH 稳定
    牛血清白蛋白(细胞培养) Absin(#abs9156) 细胞培养中保护细胞、稳定蛋白等
    台盼蓝溶液(0.4%) Absin(#abs47047622) 鉴别细胞死活,死细胞被染成蓝色
    ViaStain AO/PI 染色溶液 Absin(#abs9727) 鉴别细胞死活,活细胞染成绿色,死细胞染成红色
    裂红 Absin(#abs9101) 红细胞裂解
    裂红 BD Biosciences,(#555899 红细胞裂解
    冷冻培养基 自行配制 细胞冷冻保存,保护细胞免受冷冻损伤
    死细胞去除试剂盒 Absin(#abs60657) 去除样品中的死细胞
    肿瘤解离试剂盒 Absin(#abs50099)

     

  • 3

    抗体与细胞因子

    产品名称 品牌/型号 用途
    Mouse anti-human CD45 BD Biosciences,Cat# 563716 识别并结合人 CD45 抗原,用于免疫细胞鉴定、分选等
    Mouse anti-human CD3 BD Biosciences,Cat# 570237 识别并结合人 CD3 抗原,用于 T 细胞鉴定、功能研究等
    Mouse anti-human CD8 BD Biosciences,Cat# 612755 识别并结合人 CD8 抗原,用于细胞毒性 T 细胞鉴定等
    Mouse anti-human CD4 BD Biosciences,Cat# 563552 识别并结合人 CD4 抗原,用于辅助性 T 细胞鉴定等
    Mouse anti-human CD69 BD Biosciences,Cat# 571124 识别并结合人 CD69 抗原,用于活化免疫细胞检测等
    Mouse anti-human CD103 (Integrin alpha E) BD Biosciences,Cat# 550260 识别并结合人 CD103 抗原,用于特定免疫细胞亚群鉴定等
    FC受体阻断剂 STARTER,(S0F0002 阻断 Fc 受体,减少非特异性抗体结合
    FC受体阻断剂 BD Biosciences,Cat#564219 阻断 Fc 受体,减少非特异性抗体结合