鉴定步骤
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细胞溶解和流式细胞术分析
①按照小鼠CD11c MicroBeads UltraPure数据表的说明书，为每种细胞悬液分离CD11c +树突状细胞。 丢弃阴性部分，而阳性部分包含要通过流式细胞术检测CD11c +。
②将分离的CD11c+置于PBE缓冲液中，在4℃条件下用表中所列的抗体染色10min。
③上进行流式细胞术，并使用Flowjo™V10分析数据。
Population Marker negative Marker positive Ly6Chigh monocytes DAPI, CD3, CD19, CD90.2, Ter-119, Ly6G, B220, PDCA-1,NK1.1 CX3CR1, CD11b, Ly6C Ly6Clow monocytes DAPI, CD3, CD19, CD90.2, Ter-119, Ly6G, B220, PDCA-1,NK1.1 CX3CR1, CD11b cDC DAPI, CD3, CD19, CD90.2, Ter-119, Ly6G, B220, PDCA-1,NK1.1 CD11c, MHC-II cDC1 DAPI, CD3, CD19, CD90.2, Ter-119, Ly6G, B220, PDCA-1,NK1.1 CD11c, MHC-II, XCR1 cDC2 DAPI, CD3, CD19, CD90.2, Ter-119, Ly6G, B220, PDCA-1,NK1.1 CD11c, MHC-II, CD172a Plasmacytoid DC (pDC) DAPI, CD3, CD19, CD90.2, Ter-119, Ly6G, NK1.1 B220, Siglec-H, PDCA-1, Ly6C -
小鼠脾脏、肺和肠组织中细胞富集前后的树突状细胞和巨噬细胞的表型
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(A)解离的细胞用指定的抗体染色并通过流式细胞仪分析。 细胞被门控在P1–种群上。
(B)用DC11c MicroBeads Ultrapure富集Pan DC和CD11c +巨噬细胞，然后用指定的抗体染色并通过流式细胞仪分析（在P1–群体上进行门控）。
(C)用小鼠CD11c MicroBeads UltraPure富集之前（蓝色）和之后（红色）的CD11c +种群的比较（以P1–种群为门）。 富集得到可行的泛DC，包括特异性髓样（CD11b +和XCR-1 +）和浆细胞样（PDCA-1 +）DC亚群。