步骤
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细胞形态分析
树突细胞在分化过程中具有独特的形态。 为了评估单核细胞在Mo-DC分化和成熟过程中是否呈现这种形态，我们建议通过显微镜和流式细胞术分析第0、6和7天培养的细胞。
（1）将分离的单核细胞以及未成熟的Mo-DC（imMo-DC）和mMo-DC静置于6孔板中。
（2）使用400X的光学显微镜观察细胞形态并拍照
代表性分析结果
在第0天，细胞是圆形的，这是正常单核细胞所呈现的形态。 6天后，细胞质突起，到第7天时更为明显。此外，在流式细胞仪的前向和侧向散射光中反映了细胞的大小和颗粒度在分化和成熟的过程中逐渐增加。
图注：单核细胞，imMo-DC和mMo-DC的形态。
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图中显示了在分化/成熟的第0、6和7天细胞的形态。
（A）使用相差400倍的显微镜拍摄的图像。随着细胞分化和成熟，细胞表现出胞质突起。
（B）通过流式仪的前向和侧向散射评估在分化成熟过程细胞的相对大小和颗粒度。结果显示细胞在分化成熟时颗粒度增加。每张图收集了10000个细胞。
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通过流式细胞仪对单核细胞和Mo-DC进行表型鉴定
（1）通过特异性单克隆抗体标记单核细胞，imMo-DC和mMo-DC（请参见下表）来分析细胞表达的共刺激分子以及趋化因子和抗原。使用适当的同型对照来排除抗体的非特异性染色。
（2）在流式细胞仪上使用数据分析软件确定各个细胞标志物的平均荧光强度（MFI）。
（3）根据物理散射光和PI荧光从分析中排除细胞碎片和死细胞。
细胞表面抗原 克隆 荧光素 CD1a HI149 PE CD14 TÜK4 FITC CD25 3G10 APC CD40 HB14 APC CD54 REA266 PE CD80 REA661 PE CD83 REA304 APC CD86 FM95 PE CD206 DCN228 APC CD197（CCR7） REA108 APC CD209（DC-SIGN） REA617 APC HLA-DR AC122 FITC HLA-ABC REA230 FITC