3.2 线粒体膜电位（Δψm）检测（JC-1，流式/荧光显微镜）

1、细胞处理：6孔板接种细胞，密度70%，处理后（如药物/应激），预冷PBS洗2次，0.25%胰酶消化，4℃ 1000g离心5min，收集细胞（1×10⁶）。

2、JC-1染色：加1mL JC-1工作液（2μM，无血清培养基稀释），37℃避光孵育30min。

3、洗涤：PBS洗2次，重悬于500μL PBS。

4、检测：

a）流式：FL1（绿色，525nm）、FL2（红色，590nm），红色/绿色荧光比值代表Δψm（比值越高，电位越高）。

b）荧光显微镜：红色荧光（健康线粒体）、绿色荧光（损伤线粒体），ImageJ定量比值。