研究思路：mtROS是线粒体呼吸副产物，过量ROS导致氧化应激、线粒体损伤、细胞凋亡，常用MitoSOX Red（线粒体特异性）、DCFH-DA（总ROS）检测。
实验步骤
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实验流程（MitoSOX Red，流式/荧光显微镜）
1、细胞接种：共聚焦小皿/6孔板，密度70%，处理后，预冷PBS洗2次。
2、MitoSOX染色：工作液5μM（无血清培养基稀释，Thermo M36008），37℃避光孵育10min（特异性标记线粒体超氧化物）。
3、洗涤：PBS洗3次，Hoechst染核10min。
4、检测：
a）荧光显微镜：激发510nm，发射580nm，红色荧光强度代表mtROS水平。
b）流式细胞仪：FL2通道检测，定量mtROS阳性细胞比例。