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5.3 单细胞mtDNA测序（sc-mtDNA-seq）

5.2 mtDNA甲基化检测 | 6.1 线粒体-内质网接触位点（MAMs）

研究思路：mtDNA编码13个ETC蛋白，突变导致线粒体病、衰老、癌症，表观修饰（甲基化、羟甲基化）调控mtDNA转录，单细胞水平解析mtDNA异质性。

实验步骤

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实验流程

1、单细胞分离：流式分选/显微操作分离单个细胞，裂解后提取mtDNA。

2、全基因组扩增（WGA）：MDA扩增mtDNA，NGS测序，分析单细胞mtDNA异质性、克隆演化。

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所需试剂、耗材、仪器（扩充）

类别	名称	货号	用途
试剂	mtDNA提取试剂盒	abs50137
	蛋白酶K	abs9118
	酚-氯仿	Sigma P2069
	亚硫酸氢盐转化试剂盒	Zymo EZ DNA Methylation-Gold
	WGA试剂盒	Qiagen REPLI-g Single Cell
耗材	200uL PCR 8连管	abs7094
耗材	测序文库制备试剂盒	Illumina
仪器	PCR仪	Bio-Rad