2.1 Human T细胞刺激实验思路&workflow

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​类别​	​全称/简称​	​货号​	​用途说明​
分离试剂	Ficoll-Paque™ Plus	-	PBMC分离
培养基	基础培养基	-	含1%谷氨酰胺+1%青霉素/链霉素+10% FBS
刺激抗体	CD3 (板包被, UCHT1克隆)	S0B0009	板包被刺激方案
共刺激试剂	CD28 (CD28.2克隆)	S0B0010	增强T细胞活化
辅助试剂	Protein G	-	增强CD28共刺激效果
耗材	96孔U底板	353918	细胞培养与刺激

 

1、板包被步骤​

● CD3 UCHT1抗体（5-10μg/mL）4℃包被过夜

● 使用前PBS洗涤3次

 

2、共刺激优化​

● CD28与Protein G等浓度添加​（各5μg/mL）

● 可显著提升CD69/CD25等活化标志物表达

 

3、培养条件​

● 温度：37℃

● CO₂浓度：5-7%

● 湿度：饱和湿度

注：本方案适用于检测CD69、CD25、CD71等T细胞活化标志物，流式检测建议在培养第3/6天进行