实验步骤
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Human T细胞亚群细胞因子诱导方案
目标细胞因子 刺激方案 培养时间 重刺激方案 IL-3⁺/IL-4⁺/IL-5⁺/IL-13⁺/GM-CSF⁺ 抗CD3（UCHT1，10μg/mL 板包被） 2天 → 洗涤 → 换含IL-2/IL-4培养基培养3天 PMA（5ng/mL） + 抗CD28（2μg/mL） + 钙离子载体（250ng/mL） + rhIL-2（10ng/mL） （需添加蛋白转运抑制剂） + rhIL-4（20ng/mL） TNF-α⁺ 抗CD3（板包被） 2天 → 洗涤 → 换含IL-2培养基培养3天 方案1：PMA/离子霉素 + rhIL-2（10ng/mL） 方案2：抗CD3+抗CD28 IL-2⁺/TNF-α⁺/IFN-γ⁺ 直接刺激：PMA（5ng/mL） 6小时 - + 钙离子载体（500ng/mL） IL-1α⁺/IL-6⁺/IL-8⁺/GRO-α⁺ LPS（1.0μg/mL） 4小时 - IL-10⁺/MCP-1⁺/MIP-1α⁺/MCP-3⁺/MIG⁺ LPS（1.0μg/mL） 24小时 - IL-12⁺ 预激活：rhIFN-γ（10ng/mL）2小时 共24小时 - → 激活：IFN-γ（10ng/mL）+ LPS（1.0μg/mL） RANTES⁺ 无需刺激（组成性表达） 直接培养24小时 -