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5.1 小鼠淋巴和血液中的T细胞分型实验思路框架

4.4 Th17共培养与扩增步骤 | 5.2 小鼠淋巴和血液中的T细胞分型检测样本处理

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实验步骤

  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 5
  • 1

    实验目的

    ● 通过流式细胞术分析小鼠胸腺、脾脏和血液中T细胞的频率、活化状态及功能

    ● 调节性T细胞(Treg:FoxP3⁺CD25⁺)

    ● T细胞活化标志(CD44/CD62L分群)

    ● 细胞因子分泌能力(PMA/离子霉素刺激后检测IL-2/IL-4/IL-17/IFN-γ/TNF)

  • 2

    样本来源

    小鼠品系​:C57BL/6(≥8周龄)

       ● 血液​:心脏穿刺采集(EDTA抗凝)

       ● 胸腺​:完整摘取双叶

       ● 脾脏​:清除胰腺组织后获取

  • 3

    样本处理

    样本处理-收集细胞-细胞刺激培养-染色-固定破膜-流式鉴定

  • 4

    实验难度评估

    样本处理,需要较高的细胞活性

    荧光素亮度会收到破膜剂干扰

    胞内染色固定破膜处理过程中,会有比较大的非特异性信号

  • 5

    实验workflow详细

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