△点击放大图片
实验步骤
- 1
- 2
- 3
- 4
- 5
实验目的
● 通过流式细胞术分析小鼠胸腺、脾脏和血液中T细胞的频率、活化状态及功能
● 调节性T细胞(Treg:FoxP3⁺CD25⁺)
● T细胞活化标志(CD44/CD62L分群)
● 细胞因子分泌能力(PMA/离子霉素刺激后检测IL-2/IL-4/IL-17/IFN-γ/TNF)
样本来源
小鼠品系:C57BL/6(≥8周龄)
● 血液:心脏穿刺采集(EDTA抗凝)
● 胸腺:完整摘取双叶
● 脾脏:清除胰腺组织后获取
样本处理
样本处理-收集细胞-细胞刺激培养-染色-固定破膜-流式鉴定
实验难度评估
样本处理,需要较高的细胞活性
荧光素亮度会收到破膜剂干扰
胞内染色固定破膜处理过程中,会有比较大的非特异性信号
实验workflow详细
△点击放大图片