可自制感受态或购买商业化的感受态细胞
实验步骤
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- 2
- 3
- 4
- 5
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加入感受态细胞
取连接产物5-10ul加入制备好的感受态细胞，轻轻混匀，冰浴30-45min；
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热激90s
42℃热激90s，迅速转至冰中3-5min；
-
摇床复苏
加800ul LB培养液，37℃，150rpm，摇床复苏1h；
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涂布于平板
6000rpm，离心5min，保留沉淀及200ul LB培养液，轻轻混匀后，涂布在平板上；
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培养
平板37℃正置半小时后，倒置培养。
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