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3.1 NGS流程简介

| 4.1 样本保存

流程简介

  • 1
  • 2
  • 3
  • 4
  • 5
  • 1

    样本保存

    样本核酸的质量是生物信息学研究的第一步,也是整个流程的基础,直接关系到后续测序分析的成败,不容小觑。

  • 2

    样本制备

    对于不同类型的生物样本,其DNA提取方法略有不同,尤其是对于环境样本,需要更多预处理来去除杂质,可参考本解决方案的操作步骤。

  • 3

    NGS建库

    其本质就是在待测片段两端加上接头的过程。

    这里以IlluminaPE文库为例,建库流程如下

    1.  DNA片段化 (Fragment DNA)

    2.  末端修复(End Repair)

    3.  3' 末端加“A” (A-tailing)

    4.  接头连接( ligation adaptor)

    5.  PCR富集目的片段

    6.  扩增文库大小质检

    7.  文库浓度定量

  • 4

    上机测序

    通过对文库中数以万计的克隆进行延伸反应,检测对应的信号,最终获取序列信息

  • 5

    数据分析

    将所得上机所得数据进行分析,加以运用

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