查找目的基因序列-原核标签蛋白纯化

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1.1.1 查找目的基因序列

| 1.1.2 选择合适的表达载体

由于引物是根据目的基因序列来设计的，所以查找到目的基因序列是设计引物的第一步。查找目的基因序列可以在多个网站上查到，也可以在文献中查找。
这里介绍的是比较常用的NCBI网站查找基因序列的方法。NCBI是美国国家生物技术信息中心，网站上具有多个生物数据库，是生物学研究常用的网站。
以下对步骤进行梳理，详细操作请查看视频。

实验步骤

1

输入基因/蛋白名称

打开NCBI网站（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/），在下拉框选择Gene，输入目的蛋白名称；（这里以p65为例）

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2

选择对应物种

找到对应物种，也可以选择右侧框中的物种查找；

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3

点击mRNA and Proteins

页面往下拉，找到mRNA and Protein(s)，选择正确的isoform，NMxxx表示mRNA序列，NPxxx表示蛋白质序列；

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4

查找CDS序列

新页面往下拉，点击CDS，点击右侧FASTA，即可得到目的基因的mRNA序列，复制粘贴到新的文本，以备使用。

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