UFBP014-Mouse Treg + B cell + DC cell Panel(9色)
实验步骤
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生物学背景
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免疫细胞在机体内发挥着稳定机体健康的重要作用,担任着机体的免疫防御、免疫稳定和免疫监视的角色。本方案采用模型基因敲除小鼠为样本,展示小鼠体内 Treg 细胞、B 细胞 DC 细胞的表达情况变化。
实验信息
样本类型 Mouse spleen(C57BL/6) 方案类型 Multicolour panel 实验方案 Mouse surface maker staining 使用的仪器 Beckman CytoFLEX(3L13S) 配色方案
激光 标志物 荧光染料 克隆 体积/测试 货号 Violet 405nm CD19 BV650 1D3 5 μL 563235 CD11C BV421 N418 5 μL 565452 L/D FVS510 / 2 μL 564406 Blue 488nm CD3 FITC 145-2C11 2 μL 553061 CD4 Percp-cy5.5 RM4-5 5 μL 550954 FOXP3 PE MF23 5 μL 560408 Red 640nm CD45 APC-CY7 30-F11 5 μL 557659 CD25 APC 7D4 5 μL 563598 CD8 R718 53-6.7 5 μL 566985 逻辑设门图&数据结果说明
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使用FlowJo V10.8.1对多色方案进行分析:
C57(N=3)的脾脏样本分析逻辑如下:首先FSC-A FSC-H去除黏连细胞获取单细胞,FSC-A SSC-A获取总目的细胞,CD45+L/D-获取活的CD45+细胞,进一步圈门获得CD3+T、CD4+Th、CD8Tc,在CD4+中获得Treg细胞比例。在CD45+中继续获得B cell比例和DC细胞比例。通过TSNE插件对CD45+L/D-免疫细胞降维处理,全景展示样本内部各类免疫细胞情况;数据采集自Beckman CytoFLEX(3L13S)流式细胞仪。